BEAS-2B、H322 、 A549购自浙江美森生物技术有限公司；95-D购自镇江维根生物科技有限公司；RPMI-1640、DMEM 培养基（货号：C11875500BT、11965092）购自美国 Thermo Fisher Scientific公司；胎牛血清、0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液、青霉素-链霉素双抗溶液（货号：FSP500、E607002-0100、E607011-0100）购自上海生工技术有限公司；CCK-8 细胞增殖检测试剂、逆转录试剂盒（含gDNA酶）（货号：BS350B、BL699A）购自安徽 Biosharp 公司；基质胶、 Transwell 小室（货号：2278002、3422）购自上海康宁公司；总RNA提取试剂盒（货号：R1200）购自北京索莱宝公司；SYBR Green荧光染料（货号：22204-1）购自上海吐露港生物科技有限公司。N-cadherin、E-cadherin（CST-9782T，1∶2 000）购自上海 Cell Signaling Technology公司；ZEB1（ag16204，1∶1 000）购自武汉三鹰生物技术公司；辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）标记抗兔IgG（A0208，1∶4 000）、HRP标记抗鼠IgG（A0216，1∶4 000）购自上海碧云天生物技术有限公司；p21（ARG 58183，1∶2 000）、MDM2（ARG 51392，1∶2 000）、Cyclin D1（ARG 52923，1∶2 000）购自杭州 Arigo Biolaboratories Corp公司。
H322细胞使用含10%FBS的RPMI1640培养基培养，A549、BEAS-2B、95-D使用含10%FBS的高糖DMEM培养基培养，细胞密度达80%以上进行细胞传代。
利用GEO数据库（
质粒载体构建由江苏镇江维根生物科技有限公司进行设计和构建。载体图谱如
将对数生长的Control组、Oe-NC组和Oe-ZEB1组细胞接种到96孔板中（2×103个/孔）。每组3个复孔，培养24、48和72 h后，每孔分别加入10 μL CCK-8试剂，培养箱培养2 h后，用酶标仪在450 nm波长下检测3组细胞的吸光度值。
将3组细胞接种于6孔板（4×105个/孔），培养细胞密度至80%~90%。每孔加入1 mL EdU染色液（EdU∶完全培养基=1 μL∶500 μL），37 ℃孵育2 h。根据EdU试剂盒操作说明书加入反应体系工作试剂孵育30 min，随后用1 mL洗涤液清洗3次，每次5 min，随后加入1 mL Hoechst33342染液，室温避光孵育10 min，PBS清洗3次。最后用倒置显微镜拍照记录。
将3组细胞接种到6孔板中（4×105个/孔）培养24 h，收集离心后的细胞。加入1 mL 4%多聚甲醛固定10 min，离心后弃上清液。1 mL预冷PBS重悬，添加Hoechst33258/PI（100 μL∶10 μL）的混合工作液，避光孵育10 min，随后加入1 mL预冷PBS重悬，离心余留上清液约100 μL重悬细胞，最后加入10 μL抗荧光淬灭剂，取细胞悬液15 μL滴至载玻片上，在倒置荧光显微镜下拍照
将3组细胞接种到6孔板（5×106个/孔）培养24 h，细胞增长至80%~90%，使用200 μL枪头进行细胞划痕实验，使用PBS清洗，加入无血清培养基后使用倒置显微镜进行拍照记录，48 h后同一位置拍照，ImageJ软件计算迁移率；将3组细胞接种到6孔板（6×102个/孔），在CO2培养箱内持续培养14 d，期间每3~4 d进行换液，培养结束后使用4%多聚甲醛固定15 min，结晶紫染色15 min，随后清洗、晾干并拍照记录。
将基质胶和无血清培养基按照（1∶8）比例稀释，上室加入100 μL，放入培养箱静置（Transwell迁移无此步骤，上室直接加入200 μL细胞悬液）。待基质胶凝固后，下室加入600 μL基础培养基，随后将细胞接种到Transwell小室的上室（4×105个/孔）。培养48 h后，将小室上层残留的细胞擦掉，使用 4%多聚甲醛固定15 min，结晶紫染色15 min，随后清水清洗3次，晾干，拍照，最后使用ImageJ软件进行计数。
将3组细胞接种6孔板中待细胞长满。用总RNA提取试剂提取RNA，随后逆转为cDNA。再用SYBR green 荧光染料试剂盒进行RT-qPCR检测。具体引物序列见
RT-qPCR引物合成序列
| Gene | Sequences （5′⁃3′） | |
|---|---|---|
| F：TGACATCAAGAAGGTGGTGAAGCAG | ||
| R：GTGTCGCTGTTGAAGTCAGAGGAG | ||
| F：CCACCCTTGAAAGTGATCCAGC | ||
R：CGGTGTAGAATCAGTCATTCTG F：GTTTGCCCCTTAATGCCAT TGAACC R：GCCATAAGATGTCCTGTTT TGCCATG | ||
将3组细胞接种到6孔板中待细胞长满。使用细胞裂解液在冰上裂解30 min后提取总蛋白，SDS-PAGE电泳（恒压80 V、30 min，120 V、60 min），转膜（恒流300 mA、60 min），5%脱脂奶粉封闭2 h，一抗4 ℃过夜。TBST洗涤3次，二抗2 h，TBST洗涤3次，最后使用发光成像系统成像检测，ImageJ 进行数据分析。
将3组细胞以5×105个/孔的密度接种于6孔板中。第2天收集细胞，PBS进行重悬后，将1 mL细胞悬液滴入3 mL预冷无水乙醇至终浓度75%，在4 ℃下固定过夜。离心去除固定液后，用PBS将细胞进行重悬，室温水化15 min。加入1 mL PI染色工作液，避光孵育30 min。最后使用流式细胞仪收集细胞信号，用Mod Fit LT 5.0软件进行细胞周期阶段拟合分析。
采用 SPSS 27.0和 GraphPad Prism 8.0软件进行统计学分析以及图表绘制。计量数据采用