压力是指作用于物体接触面并导致其体积或形态缩小的力。在颅骨系统中，颅内压（intracranial pressure， ICP）是主要的压力形式，其动态变化与颅脑发育密切相关^［1］。大脑容积在婴儿出生后两年内迅速增长，扩容所产生的压力提高了硬脑膜细胞中成骨分化标志物（如：骨桥蛋白，Ⅰ型胶原蛋白等）的表达水平，这可能在协调新生儿颅骨的生长中发挥重要作用^［3］。以颅骨发育异常阿佩尔综合征（Apert syndrome）为例，Apert综合征表现为颅缝早闭进而导致ICP升高，Apert综合征患儿对慢性高颅压表现出明显的颅骨适应，综合征的特征是颅内容物增加和颅骨密度下降，高颅压导致颅骨密度降低，颅骨厚度增加^［4］。机械压力通过诱导Wnt配体表达来刺激成人骨形成^［5］，同时，在部分骨膜增生颅骨筋膜炎患者中，检测出Wnt通路异常活化，β-连环蛋白（β-catenin）蛋白核染色^［6］。机械压力在骨细胞中通过激活Wnt/β-catenin通路，对骨代谢进行调节 ^［7］。

细胞外基质（extracellular matrix， ECM）在组织再生和疾病进展过程中经历动态重塑和渐进性硬化。实验设计^［8］采用了一种模仿天然ECM动态特性的自强聚合物涂层。证明了自增强张力的反应依次激活α5β1整联蛋白（integrin alpha-5 beta-1， α5β1）和αvβ3整联蛋白（integrin alpha-v beta-3， αvβ3）以及Rac蛋白（ras-related C3 botulinum toxin substrate，Rac）、RhoA蛋白（ras homolog ogene family， member A， RhoA）、Rho激酶（rho-associated coiled-coil containing protein kinase， ROCK）信号转导。整联蛋白活性的增强和Rho家族GTP酶（Rho GTPases）信号转导促进细胞机械转导和随后的BMCSs成骨分化^［8］。

在控制成骨的机械载荷（流体剪切应力）诱导的信号级联反应中，小鼠胚胎头盖骨前成骨细胞系（MC3T3-E1）成骨细胞需要压电机械敏感离子通道蛋白1（piezo-type mechanosensitive ion channelcomponent 1， Piezo1）通道来适应外部机械流体剪切应力，通过蛋白激酶B（protein kinase B， AKT）/糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3 beta GSK-3β） / β-catenin途径诱导成骨细胞runt相关转录因子 2（runt-related transcription factor 2， Runx-2）基因表达^［9］。在含有骨样ECM的钛（Ti）纤维网支架上，种植大鼠BMSCs，同一TiECM支架在灌流条件下的矿化量为静态培养的5倍。表明骨样ECM和流体剪切力之间具有协同效应^［10］。

整合素是细胞表面受体，可将ECM成分连接到肌动蛋白细胞骨架，并通过黏附复合物将化学和机械信号传递到细胞中^［11］。整合素介导的机械力感知具有“刚性依赖”特征，当ECM（1~30 kPa）与细胞骨架张力达到力学平衡时，触发FAK/Src磷酸化级联反应^［12］，同时有研究^［13］表明，机械力通过改变ECM刚度，影响细胞黏附和迁移，基质刚度（1~30 kPa）通过Yes相关蛋白 （yes-associated protein，YAP）/PDZ结合基序的转录共激活因子（transcriptional co-activator with PDZ-binding motif，TAZ）信号调控BMSCs向成骨或软骨分化^［14］。

Piezo1是机械激活的离子通道，是多种细胞类型中机械感应功能所必需的^［15］。Piezo1通道在成骨细胞^［16］中高表达，生物力学和基质刚度上调了Piezo1通道的表达，促进了钙调神经磷酸酶和活化T细胞核因子胞质型1（nuclear factor of activated t-cells， cytoplasmic 1， NFATc1）的协同激活^［17］，激活钙调蛋白依赖的NFATc1通路，抑制破骨细胞生成，驱动骨基质矿化^［18］。机械刺激瞬时受体电位香草酸亚型4（transient receptor potential vanilloid 4， TRPV4）通道，增强细胞内Ca²⁺的激活水平，促进成骨细胞特异性基因的表达并增加骨矿化。TRPV4通道激活也会影响线粒体Ca²⁺水平和线粒体代谢^［19］。Piezo1通道作为一个关键的机械门控离子通道，其与TRPV4通道之间的相互作用逐渐受到关注，特别是在炎症反应方面，Piezo1通道和TRPV4通道具有协同作用^［20］。有研究^［21］结果表明成骨细胞表达的Piezo1通道和TRPV4通道共同参与机械应力期间的机械感知过程。见图1。

由于组织刚度、细胞骨架重组和细胞物理环境的变化（即使是细微的），细胞内可能会产生机械力。这些变化在细胞内蛋白质网络（胞质和细胞核）内施加了机械张力^［22］。例如，F-肌动蛋白细胞骨架重组导致的细胞内压缩力降低进而影响细胞核的机械内和机械外环境，这种变化可能影响成骨分化过程中的基因表达和DNA复制^［23］。持续静水压力通过一系列涉及SRY框转录因子9（SRY-box transcription factor 9， SOX9）、RUNX2和多囊藻毒素-1、2 的分子事件刺激软骨细胞分化^［24］ 。研究^［25］证实，机械张力通过驱动自噬介导的骨细胞生成因子成纤维细胞生长因子23（fibroblast growth factor 23， FGF23）促进成骨。垂直全身低幅度高频振（vertical whole-body low-magnitude high-frequency vibration， LMHFV）可能通过机械敏感Wnt/β-catenin通路促进骨再生^［26］；此外，周期性拉伸力增强骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein 2， BMP2）表达，协同促进骨形成^［27］。细胞物理环境的改变会影响细胞蛋白调控及基因表达。

机械力会通过影响线粒体调控细胞的能量代谢^［28］，流体剪切应力激活了三羧酸循环（tricarboxylic acid cycle，TAC），从而促进成骨细胞中线粒体能量的产生，使三磷酸腺苷（adenosine triphosphate， ATP）产量提升，为骨细胞增殖提供能量^［29］。在BMSCs中，30~90 nm、1 000 Hz纳米振动促进成骨基因表达和成骨细胞生成。这种生物物理刺激增加了Piezo2通路和TRPV1通路的表达，并上调了线粒体代谢，包括糖酵解和TAC循环以及反应性氧种（reactive oxygen species， ROS）生成^［30］。见图2。

机械力在骨再生中的作用至关重要，通过协调骨组织内多种细胞的时空行为，实现精准调控。该过程涉及多个机制：① 骨细胞层状小管形态和网络结构（骨细胞网络）^［31］，作为力学信号的“中枢处理器”，骨细胞通过初级纤毛感知机械刺激^［32］，通过Piezo1和靶向连接蛋白43等通道传递信号，协调成骨细胞的迁移并平衡骨吸收与形成^［33］；② 机械刺激通过骨髓来源巨噬细胞分泌外泌体，促进BMSCs成骨^［34］；③ 免疫-骨骼细胞协同调控，机械力通过影响巨噬细胞极化^{［35–36］}、T细胞活化^［37］和中性粒细胞招募^［38］，促进骨修复与再生；④ 血管-成骨单元协同构建，巨噬细胞通过Piezo1通路调节机械负荷诱导的血管生成-成骨耦合，支持血管化骨组织的形成^［39］。这些机制相互协作，促进骨修复与再生，为骨组织工程和再生医学的临床应用提供了新的思路和策略。

负压技术通过局部力学刺激调控微环境，成为颅骨缺损修复的重要辅助手段，其作用机制主要包括改善血流、增强干细胞活性及调控成骨微环境。有研究^{［40–41］}表明负压诱导硬脑膜血管向缺损区迁移，通过激活血小板内皮细胞黏附分子-1（cluster of differentiation 31，CD31）/内皮黏蛋白（endomucin， EMCN）内皮细胞介导的“血管-成骨耦合”并显著增强支架孔隙内血管侵入能力；负压伤口治疗（negative pressure wound therapy， NPWT）通过AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase， AMPK）-Unc-51样激酶1（Unc-51 like kinase 1， ULK1）自噬轴促进BMSCs的成骨细胞分化和骨再生^［42］。见图3。

硬脑膜作为距离颅骨缺损最近的组织之一，在颅骨缺损中扮演重要角色^［43］。硬脑膜细胞通过细胞外囊泡途径，对于成骨细胞分化有极强的促进作用^［44］。同时硬脑膜在机械张力刺激下释放成骨因子并调控干细胞行为。硬脑膜细胞在施加10%双轴应变后，增殖率提升5.8倍，同时FGF-2和BMP-2分泌量分别增加4.5倍和3.2倍，显著促进BMSCs成骨分化^［3］。见图4。

骨膜对力的反应刺激皮质骨迁移^［45］。机械负荷通过Piezo1通路的信号传导诱导骨膜CD68 F4/80髓系细胞分化为CD68 F4/80巨噬细胞以分泌转化生长因子（transforming growth factor， TGF）-β1，TGF-β1进而募集骨祖细胞^［46］。研究^［47］显示，在骨表面和骨膜之间人工创造空间，无需皮质切开术即可产生新骨。目前已经有团队^［48］研发用于骨修复的具有磁响应特性的人工骨膜，这种人工骨膜通过响应施加的磁场产生的拉伸变形模仿了天然骨膜，复制了体内所经历的机械力，促进细胞增殖和成骨分化。身体的不同部位骨膜具有不同的成骨类型和能力，例如胫骨骨膜可以通过膜内骨化和内软骨增生两种机制形成新骨，而颅骨骨膜只能通过膜内骨化形成新骨^［49］。此外，胫骨骨膜的成骨能力远强于颅骨骨膜^［50］。骨膜对力刺激的反应，可为临床骨修复提供新靶点。