2013年第一期_2013__安徽医科大学学报

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主办单位：安徽医科大学

主编：翁建平

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ISSN 1000 - 1492

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2013年第一期

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乳源免疫调节肽诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的研究

顾芳;秦宜德;桂丽;王巍;唐宜桂;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.001

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杯状细胞及5-HT、SP-IR细胞在药物依赖性便秘大鼠盲肠中的表达及意义

巫全胜;高健群;钱宁;吴曙光;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.002

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马钱子碱经皮给药对乳腺癌种植瘤中VEGF mRNA和COX-2 mRNA表达的影响

夏克春;张梅;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.003

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黄芪总苷诱导NB4凋亡过程中死亡受体通路分子变化

谢晶;夏瑞祥;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.004

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NKx2.5基因在孕鼠肥胖致胚胎心脏畸形中的表达及意义

刘伟;陶芳标;汪思应;黄德武;王晓红;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.005

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左甲状腺素和维生素E对甲状腺功能减退症大鼠心肌损伤的影响

万思源;蔡传元;张艳青;钟兴;方朝晖;潘天荣;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.007

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呼吸道合胞病毒感染BALB/c鼠活化TLR7介导的抗病毒作用研究

杨晓梅;黄升海;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.006

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摘要:
目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染BALB/c鼠后,肺内Toll样受体7(TLR7)的水平变化,初步研究TLR7活化在RSV感染中介导产生的I型干扰素(IFN)抗病毒作用及其可能的调控机制。方法以RSV滴鼻感染BALB/c鼠建立急性肺炎模型,并预先给予TLR7特异性激动剂咪喹莫特(Imiquimod)处理,分别于感染后4、8、12、24 h不同时间点处死小鼠取肺组织,并以未感染病毒的BALB/c鼠为正常对照组。①HE染色观察肺的病理学改变;②用TRIzol提取肺组织总RNA,RT-PCR法检测鼠肺内TLR7、干扰素调节因子3(IRF3)、干扰素调节因子7(IRF7),干扰素α(IFN-α),干扰素β(IFN-β)及RSV融合蛋白基因(F基因)mRNA的表达;③Western blot法检测鼠肺组织TLR7蛋白的表达变化;④空斑形成实验(PFU)测定各组不同时间点肺组织匀浆中RSV滴度。结果①HE染色显示肺部炎性细胞浸润及肺泡结构破坏程度随感染时间延长而加重,经Imiquimod干预后肺部炎性细胞浸润程度及肺泡结构破坏较RSV感染组明显减轻;②在mRNA转录水平,RSV感染早期,感染组上调TLR7、IRF3/7、IFN-α/β、RSV F基因的表达;在预先给予TLR7特异性激动剂Imi-quimod处理组,TLR7、IRF7、IFN-α的mRNA比感染组相同时间点的表达量明显升高,且升高有显著性差异,而IRF3、IFN-β表达量在Imiquimod干预后与RSV感染组相比升高不明显;而RSV F基因的mRNA表达量较RSV感染组明显下降;③在蛋白水平,RSV感染组上调TLR7蛋白的表达;在预先给予TLR7特异性激动剂Imiquimod处理组,TLR7蛋白表达量较感染组显著升高;④RSV感染BALB/c鼠肺后,肺组织匀浆中RSV滴度随感染时间的延长而增加;给予TLR7激动剂Imiquimod处理组,RSV复制滴度水平较感染组明显减少。结论 RSV感染BALB/c鼠后通过活化TLR7,诱导Ⅰ型IFN的产生。用Imiquimod激动TLR7后,Ⅰ型IFN表达量较RSV感染组明显升高,RSV F基因和肺组织匀浆中RSV滴度水平明显减少,以及肺部炎症减轻,表明RSV引起的抗病毒免疫机制与TLR7活化的转导途径有关;而且激动TLR7后,IRF7和IFN-α的表达较IRF3和IFN-β明显升高,表明了IFN-α可能是主要通过IRF7通路由TLR7诱导产生的最主要Ⅰ型IFN。

GIT2参与NF-κB信号通路的负调控

黄晓碧;汪思应;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.008

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视黄醇结合蛋白4在妊娠期糖尿病发病中的作用及其敲低对ERK磷酸化的影响

陈冠军;鲁云霞;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.011

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摘要:
目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者脂肪细胞因子瘦素、视黄醇结合蛋白4(RBP4)、脂联素与炎症细胞因子白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系。制备人RBP4分子RNAi载体及真核表达载体并检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法①选择GDM孕妇60例,正常糖耐量孕妇(NGT)44例,采用ELISA法检测两组孕妇血清中脂联素和RBP4水平,放射免疫法检测两组孕妇空腹胰岛素(FIns)、瘦素、IL-6、TNF-α的水平,葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FBG)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI),酶法检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),比色法测定游离脂肪酸(FFA)水平,计算晚孕期体重指数(BMI),并进行Pearson相关分析。②分别构建针对RBP4基因表达框5'端和3'端的干涉载体pSilencerTM4.1-RBP4-5',pSilencerTM4.1-RBP4-3'及pSecTag-RBP4真核表达载体,经测序和酶切鉴定后将干涉载体转染人LO2细胞株,RT-PCR和Western blot法确定其干涉RBP4表达的效率,选择干涉较高的载体用于后续实验。③将LO2细胞分为未转染的空白对照组、阴性对照组、转染pSecTag-RBP4质粒的RBP4高表达组和转染pSilencerTM4.1-RBP4的RBP4低表达组,Western blot检测ERK1/2的表达及磷酸化水平的改变,葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖的残留量。结果①与NGT组孕妇比较,GDM组孕妇的空腹血糖、血脂、FFA、瘦素、IL-6、TNF-α、RBP4均明显升高,脂联素水平明显下降,存在显著的炎性激活及胰岛素抵抗;HOMA-IR、RBP4、瘦素与IL-6、TNF-α呈正相关,ISI、脂联素与IL-6、TNF-α呈负相关。②构建的真核表达载体和干涉载体经酶切、测序鉴定结果正确,并有明显的高表达或干涉效果,选择pSilencerTM4.1-RBP4-5'进行干涉实验。③经Western blot分析,与空白对照组相比,各组蛋白ERK1/2的表达量均无明显变化;pSecTag-RBP4高表达组的ERK1/2的磷酸化显著下降,pSilencerTM4.1-RBP4-5'干涉组的ERK1/2的磷酸化显著上升。胰岛素刺激后pSecTag-RBP4高表达组的葡萄糖摄取明显下降,pSilencerTM4.1-RBP4-5'组的葡萄糖摄取明显增加。结论①GDM患者的炎性激活与过度分泌的脂肪细胞因子之间存在明显的正相关,可能是GDM中胰岛素抵抗发生发展的机制之一。②成功制备RBP4基因的干涉载体和应用于LO2细胞中ERK1/2的研究,为后续RBP4对MAPK信号通路的进一步研究奠定基础。

联合使用Rad001和Propachlor通过增强自体吞噬协同诱导前列腺癌细胞凋亡

邰胜;梁朝朝;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.024

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摘要:
目的比较两种常用的前列腺癌细胞系PC3及LNCaP与小细胞神经内分泌细胞癌(SCNC)及前列腺腺癌的相关性及特点。对5 000个广泛使用的小分子进行筛查实验,去发现能够同Rad001协同诱导前列腺癌细胞细胞毒性的一些化合物;探讨其同Rad001协同抗前列腺癌的分子机制。方法建立前列腺癌LNCaP及PC3细胞的同种异体动物移植模型,同人类前列腺腺癌及SCNC之间,使用免疫组化及Western blot法对相关关键信号分子的表达情况进行比较。使用Chou TC的模型去验证Propa-chlor同Rad001协同抗前列腺癌的效应,运用流式细胞术对协同时引起凋亡的细胞比例进行定量,Western blot的方法对凋亡及自体吞噬时重要的分子表达情况进行了比较。同时使用免疫荧光、电镜的方法检测自体吞噬时的形态变化。建立前列腺癌PC3细胞同种异体移植的小鼠模型,验证联合使用Rad001和Propachlor协同抑制肿瘤生长的效应。结果 LNCaP细胞表达雄激素受体(AR)及前列腺特异性抗原(PSA)分子,同时当雄激素撤退时,LNCaP细胞的生长受到了抑制,这点同人类前列腺腺癌十分相似。PC3细胞不表达AR及PSA分子其生长不受雄激素的影响,这点同人类的SCNC十分相似。前列腺腺癌细胞及LNCaP细胞的神经内分泌及干细胞相关的标记物(CD44)均为阴性;而SCNC及PC3则均为阳性。LNCaP细胞同前列腺腺癌细胞一样有着相似的细胞骨架成分;而PC3细胞同SCNC一样有着相似的细胞骨架成分。当前列腺癌PC3及C4-2细胞接受了Rad001和Propachlor的联合处理后,会引起更为显著的细胞毒效应;同时联合处理后绝大多数的联合治疗指数(CI)<0.9。联合使用Rad001和Propachlor具有显著的协同效应。同时当PC3及C4-2接受了Rad001和Propachlor的联合处理后,凋亡细胞的比例同接受单一Rad001或Propachlor处理相比明显增加。自体吞噬途径中相关蛋白LC3-2、Atg5-Atg12、Beclin1的表达明显增加;同样电镜及荧光显微镜下自噬小体的表达明显增加;Beclin1 mRNA的转录活性明显增强。同样在前列腺癌细胞PC3小鼠的异体移植动物模型中,联合使用Rad001及Propachlor也能协同抑制肿瘤的生长。结论 LNCaP细胞具有前列腺腺癌的特点;而PC3细胞具有前列腺小细胞癌的特点。联合使用两种化合物Rad001和Propachlor可以协同导致两种激素非依赖性前列腺癌细胞(PC3及C4-2细胞,对传统去势治疗耐受的前列腺癌细胞)的死亡。该研究发现了一种新的化合物Propachlor能够同已知的化合物Rad001在体外、体内水平协同抗前列腺癌,且诱导自体吞噬可以做为一种新颖的治疗前列腺癌的方案。

实验性矽肺大鼠肺泡灌洗液中巨噬细胞和白介素6的变化及意义

唐婷婷;沙泉;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.028

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围生期高剂量双酚A暴露对仔鼠生命早期调节性T细胞的影响

丁宋军;李云;房魏;沈彤;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.009

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城市居民含糖饮品的消费量与肥胖的关联研究

黄秋;邵继红;徐璐;俞黎黎;蔡云清;苗升浩;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.010

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OHSS高危患者两种移植方案的临床结局分析

谢鑫;曹云霞;周平;吴欢;张媛媛;刘迎春;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.012

浏览(59)

非甾体类抗炎药对白内障术后黄斑水肿的作用

高雯;廖荣丰;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.013

浏览(62)

白血病异基因造血干细胞移植术后中枢神经系统复发的临床研究

李来玲;王兴兵;孙自敏;刘会兰;耿良权;丁凯阳;刘欣;杨会志;韩永胜;汤宝林;朱小玉;薛磊;姚雯;朱薇波;王祖贻;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.014

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TNF-α、IL-6、IL-10、VCAM-1、E-Selectin在真菌性血流感染中的作用

梁珺;张洲;徐元宏;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.015

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移植肾穿刺活检60例的病理学研究

隋燕霞;王凯;侯军;李晓峰;杨喆;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.016

浏览(60)

精神分裂症患者童年创伤与梦威胁模拟水平和功能失调性态度的相关性研究

赵子丛;董毅;汪凯;李慧;谢雯;程赓;张爱国;常荷;李倩倩;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.017

浏览(60)

未见原核的卵母细胞发育形成的优质胚胎的移植价值分析

章师平;周平;章志国;邢琼;曹云霞;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.018

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HCMV活动性感染与尿路上皮癌的相关性研究

施浩强;葛俊;唐亮;杜俊华;张涛;王明丽;于德新;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.019

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冠状动脉搭桥患者术后左室收缩功能的二维斑点追踪研究

何丹青;王玲;赵晟;郑言言;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.020

浏览(60)

轻度认知障碍患者的SPECT与TCD脑血流改变

王前友;王文静;刘亮;程义壮;金晓毛;姚晓波;徐俊健;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.021

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脂联素启动子单核苷酸多态性频率及其水平与2型糖尿病的相关性

王琴;管世鹤;童杨;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.022

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精神分裂症患者内部动机、眼区基本情绪与精神症状三者间的关系

李倩倩;董毅;汪凯;Jimmy Choi;杨丽达;朱春燕;刘勇;李慧;赵子丛;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.023

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脂肪间充质干细胞的免疫学特性及其在组织工程中的应用

汪婧;徐燕;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.025

浏览(62)

足细胞参与局灶节段性肾小球硬化的机制研究

尚懿纯;曹式丽;窦一田;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.026

浏览(61)

pEGFP-C2-TRPM7重组质粒的构建及表达

徐涛;黄成;李琳;张磊;吕雄文;李俊;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.027

浏览(64)

半椎板入路显微手术在椎管内肿瘤中的临床应用

高进苗;张晓东;冯春国;程毅飞;万强;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.029

浏览(70)

数字化成像技术诊断下颌第一前磨牙根管形态的准确性研究

李午丽;李颂;吴光远;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.030

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Ahmed引流阀植入术治疗难治性青光眼临床疗效分析

丁碧青;程萍;陶黎明;

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2013.01.031

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安徽医科大学

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