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自噬对PC9/GR细胞吉非替尼敏感性及PD-L1影响的体外研究

安徽医科大学学报 2021 10 v.56 1535-1540     字体:

基金项目: 安徽省2018年度重点研究与开发计划项目(编号:1804h08020240)

作者:李轩;程浩;方乐;郝吉庆;

关键词:自噬;;程序性死亡配体1;;EGFR-TKI耐药;;非小细胞肺癌

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.10.006

〔摘 要〕 目的探讨在体外影响自噬对吉非替尼耐药肺腺癌细胞PC9/GR药物敏感性及程序性死亡配体-1(PD-L1)的影响。方法实时荧光定量PCR及Western blot法检测吉非替尼敏感细胞株PC9及吉非替尼耐药细胞株PC9/GR自噬相关蛋白LC3II/LC3I、Beclin1及PD-L1表达水平;CCK-8实验检测PC9和PC9/GR细胞对吉非替尼敏感性以及抑制PC9/GR自噬后各组细胞增殖情况;Western blot法检测调控PC9/GR自噬后LC3II/LC3I、p62及PD-L1的表达。结果PC9/GR细胞中自噬及PD-L1表达高于PC9细胞,CCK-8实验显示PC9/GR细胞对吉非替尼IC50高于PC9细胞,抑制自噬后PC9/GR细胞对吉非替尼药物敏感性部分恢复(P<0.05)。Western blot显示在PC9/GR细胞中诱导自噬PD-L1表达增加,抑制自噬PD-L1表达减少,且随自噬抑制剂处理的时间及浓度的改变而变化(P<0.05)。结论体外实验结果提示,抑制自噬可能增强肺腺癌耐药细胞对吉非替尼的敏感性,提示PD-L1可能被自噬调控,PD-L1可能参与体外抑制自噬逆转吉非替尼耐药的过程。