基金项目: 国家自然科学基金面上项目(编号:81573443、81673444、81973332);;安徽省自然科学杰出青年基金(编号:170808J10);;高校优秀青年人才支持计划重点项目(编号:gxyqZD2016043)
作者:王新伟;赵英杰;李素素;王越业;贾成艳;常艳;魏伟;
关键词:人脐带间充质干细胞;;芳香烃受体;;细胞增殖;;软骨分化
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.09.013
〔摘 要〕 目的探究芳香烃受体(AhR)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖和软骨分化能力的影响。方法用AhR-homo-1432 inhibitor和AhR-homo-1432 inhibitor阴性对照转染hUC-MSCs,设为si-AhR组和si-NC组。在转染hUC-MSCs后的第1、3、5、7天,CCK-8法测定细胞活力;软骨分化诱导培养hUC-MSCs 7 d,实时荧光定量PCR和Western blot检测软骨分化标志物SOX-9和COL2A1 mRNA和蛋白的表达;阿利新蓝染色检测蛋白聚糖的表达。结果与si-NC组比较,si-AhR组AhR的mRNA和蛋白水平表达降低,表明转染成功。CCK-8实验结果显示,与si-NC组比较,转染后的第5天和第7天si-AhR组hUC-MSCs活力增强。经软骨分化诱导培养后,与si-NC组比较,si-AhR组hUC-MSCs的SOX-9和COL2A1 mRNA和蛋白表达升高;阿利新蓝染色结果显示,si-AhR组hUC-MSCs表达的蛋白聚糖含量较si-NC组增多,染色更深,软骨分化能力增强。结论抑制AhR表达可促进hUC-MSCs的增殖和软骨分化。