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LSS基因敲除小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定

安徽医科大学学报 2021 08 v.56 1335-1338     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81271748);;安徽省高等学校自然科学研究项目(编号:KJ2017A195)

作者:李名聪;孙晓梅;李昱昊;周宏;罗欣;张胜权;

关键词:LSS;;基因敲除小鼠;;基因型鉴定;;聚合酶链式反应体系;;繁育

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.08.034

〔摘 要〕 探讨羊毛固醇合成酶(LSS)基因敲除鼠的繁育和基因型分析。将引进杂合子小鼠进行饲养并繁育,提取其基因组DNA,利用PCR反应扩增目的基因片段,鉴定出小鼠的基因型;Western blot分析并比较LSS基因敲除杂合子小鼠和野生型小鼠的肝脏、皮肤组织中LSS蛋白的表达情况。成功的繁育出LSS基因敲除小鼠,使用PCR鉴定其子代小鼠包括野生型(LSS~(+/+),Wt)、杂合子(LSS~(+/-)),未出现纯合敲除小鼠;Western blot结果表明:相较于野生型小鼠,LSS基因敲除杂合子小鼠在肝组织和皮肤组织中表达LSS蛋白量少;杂合子敲除鼠的生存能力比野生型小鼠弱。获得LSS基因敲除小鼠,PCR鉴定小鼠基因型具有简单、稳定的优点。