安徽医科大学学报
2014 02 v.49 181-185
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基金项目: 国家自然科学基金(编号:81171662);;安徽省卫生厅中医药计划科研基金(编号:2012ZY110)
作者：孙蓓蓓;管世鹤;王爱华;杨凯;潘颖;吴园园;
关键词：乙型肝炎病毒;;核心蛋白;;HepG2细胞;;IFN-α
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.02.011
〔摘 要〕 目的构建乙型肝炎病毒核心蛋白(HBc)突变体L60V重组质粒,并探讨L60V拮抗α干扰素(IFN-α)抗病毒活性的机制。方法构建HBc突变体融合表达载体pEGFPL60V,转染人肝胚瘤细胞株HepG2细胞,荧光显微镜及Western blot法检测其在细胞中的表达;并以RT-PCR及Western blot法检测JAK-STAT信号转导途径分子及抗病毒蛋白表达。结果经酶切和测序分析,成功构建HBc突变体L60V重组质粒;将L60V和HBc野生株表达质粒(pEGFP-WT)分别转染HepG2细胞后,以1 000 IU/ml IFN-α处理,转染L60V和HBc野生株表达质粒的细胞内抗黏液病毒A(MxA)及JAK-STAT信号转导途径分子STAT1、STAT2、IRF9表达减少,其中在转染pEGFP-L60V细胞内的MxA、STAT1、STAT2和IRF9表达显著减少。结论 HBc突变体L60V可能通过JAK-STAT信号转导途径抑制抗病毒蛋白MxA的表达来拮抗IFN-α的抗病毒作用;其拮抗IFN-α抗病毒作用比HBc更显著。