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新生SD大鼠心肌细胞的原代培养及荧光鉴定

安徽医科大学学报 2014 01 v.49 120-122     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:040713103)

作者:姬婷婷;徐岩;张建华;赵勇;

关键词:心肌细胞;;原代培养;;新生大鼠;;免疫荧光

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.01.032

〔摘 要〕 采用单纯胰蛋白酶消化法分离,差速贴壁法纯化新生大鼠心肌细胞。光学显微镜观察心肌细胞基本形态特征,台盼蓝染色检测成活率,肌钙蛋白Ⅰ、α-横纹肌肌动蛋白抗体鉴定心肌细胞。结果显示培养24 h后心肌细胞大部分已贴壁,并出现自发搏动现象,48 h后逐渐伸出伪足相互接触交织成网,72 h后逐渐形成细胞簇并出现同步搏动;台盼蓝染色法检测细胞成活率达90%以上;肌钙蛋白Ⅰ及α-横纹肌肌动蛋白免疫荧光染色法鉴定心肌细胞纯度达98%以上。