基金项目: 国家自然科学基金(编号:81730055)
作者:陈迎;李建;曹炎;何云凌;吴丽颖;周钢桥;
关键词:红系分化;;低氧;;HCAR2;;K562细胞
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.08.001
〔摘 要〕 目的 研究低氧下羟基羧酸受体2(HCAR2)对人慢性髓系白血病细胞K562向红系细胞分化的影响。方法 在含氯化血红素(hemin)的培养基中培养细胞,比较常氧/低氧条件下K562细胞向红系分化的能力,以及在此过程中HCAR2的表达情况。进而利用遗传学手段干预HCAR2表达,分别使其在K562细胞中敲低或过表达,通过联苯胺染色、RT-qPCR、Western blot及流式细胞术检测HCAR2在低氧促K562细胞向红系分化中的作用。结果 K562细胞向红系分化1、2、3 d后,HCAR2的表达水平和K562细胞向红系分化的能力均随时间逐渐升高,并在低氧条件下得到增强;在K562细胞中敲低HCAR2,诱导分化后红细胞生成减少,且红系分化标记分子CD235a、γ-珠蛋白(γ-globin)的mRNA和蛋白表达均降低,红系细胞膜表面分子CD71和CD235a双阳性细胞比例下降;相反,在K562细胞中过表达HCAR2,与对照组相比,诱导分化后红细胞生成增加,且CD235a、γ-globin的mRNA和蛋白表达水平均升高,CD71/CD235a双阳性细胞比例也有所增加。结论 HCAR2介导了低氧促进K562细胞向红系分化。