安徽医科大学学报
2011 09 v.46 853-857
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基金项目: 国家自然科学基金(编号:30971067);; 上海市中医医院院级课题(编号:038704)
作者：王志成;张晓峰;陈晓宇;戴克胜;
关键词：血小板;;线粒体;;细胞凋亡;;他莫昔芬
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2011.09.004
〔摘 要〕 目的探讨三苯氧胺(TAM)诱导血小板凋亡作用及其分子机制。方法取健康志愿者静脉血,分离得到富含血小板血浆(PRP)和洗涤血小板,血小板与不同浓度TAM孵育后,流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸(PS)暴露、线粒体跨膜电位(ΔΨm)去极化、胞质Ca2+浓度;Western blot检测活化的caspase-3和gelsolin酶解产物。在抑制实验中,血小板先与线粒体通透性转换孔(MPTP)抑制剂环孢素-A(Cyp-A)或二甲基亚砜(DMSO)预孵育,然后再与TAM孵育,流式细胞仪和Western blot检测凋亡标志物。结果 TAM浓度依赖地诱导血小板PS暴露、ΔΨm去极化、胞质Ca2+浓度增加和活化的caspase-3。Cyp-A抑制TAM诱导的PS暴露、ΔΨm去极化和caspase-3活化,但不抑制胞质Ca2+浓度升高。结论 TAM能够诱导血小板发生凋亡,MPTP在TAM诱导的血小板凋亡中可能起关键作用