基金项目: 国家自然科学基金(编号：81660083);;贵州省科技计划项目(编号：黔科合平台人才[2020]5014);;贵州省高层次创新型人才培养计划项目(编号：黔科合人才[2015]4026号)
作者：龚才伟;赵广建;刘大男;欧航君;赵权威;李辉;
关键词：达格列净;人髓系白血病单核细胞;泡沫细胞;细胞焦亡;氧化低密度脂蛋白
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.08.020
〔摘 要〕 目的 探讨达格列净(DAPA)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导形成的人髓系白血病单核细胞(THP-1)源性泡沫细胞焦亡中的作用。方法 通过ox-LDL诱导THP-1源性巨噬细胞构建THP-1源性泡沫细胞焦亡模型。设置实验分组为：空白对照(NC)组、ox-LDL组和药物干预(ox-LDL+DAPA)组；以油红O法检测巨噬细胞泡沫化水平；细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)检测DAPA对泡沫细胞活力的影响；Hoechst 33342/PI双染检测THP-1源性泡沫细胞焦亡；细胞免疫荧光双染检测DAPA对泡沫细胞焦亡中焦亡关键因子Caspase-1表达的影响；采用微量酶标法检测细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性；采用qRT-PCR和Western blot分别检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、消皮素D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-18、IL-1β mRNA和蛋白表达水平。结果 CCK-8法检测结果提示DAPA的最佳干预浓度为10μmol/L;油红O染色结果示THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞焦亡模型构建成功；与NC组比较，ox-LDL组中NLRP3、Caspase-1、ASC、GSDMD、IL-18、IL-1β mRNA和蛋白表达水平均升高(P