基金项目: 国家自然科学基金(编号：81660214、81960238);;内蒙古自治区自然科学基金(编号：2020MS08013);;内蒙古自治区高等学校科学研究项目(编号：NJZZ20168);;内蒙古自治区科技成果转化项目(编号：NM2019BT052);;包头市医学重点学科建设项目(编号：BWXK201910);;包头医学院科学研究基金(编号：BYJJ-YF-2018004);;国家临床重点专科建设项目(编号：Z155080000004)
作者：赖文涛;赵志军;张春阳;
关键词：脂肪干细胞;;Bmp2;;成骨分化
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.06.015
〔摘 要〕 目的探究在大鼠脂肪干细胞内过表达骨形态发生蛋白2(Bmp2)后成骨基因的表达情况以及成骨能力的变化。方法通过电转染Bmp2至大鼠脂肪干细胞内，以空白组作为对照，分为空白对照组(Control组)、空载组(Vector组)、成骨诱导组(Inducement组)、过表达组(Bmp2组),采用Western blot、qRT-PCR及免疫荧光对比成骨基因表达情况，采用碱性磷酸酶染色与茜素红染色观察硫化钴沉淀及钙盐沉积情况。结果Western blot与qRT-PCR检测显示，与Control组相比，Bmp2组的Bmp2、Bmp4、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)、矮小相关转录因子2(Runx2)、磷酸化大鼠信号转导分子1/5(P-Smad1/5)、远端缺失同源框2(Dlx2)、骨涎蛋白(BSP)表达显著增高(P<0.05),而Smad1/5的表达情况差异无统计学意义；免疫荧光检测显示，与Control组相比，Bmp2组的OPN、Runx2荧光强度显著增高(P<0.05);茜素红染色及碱性磷酸酶染色结果显示，与Control组相比，Bmp2组细胞周围钙盐沉积增多，硫化钴沉淀增多，碱性磷酸酶活性增强。结论过表达Bmp2增强了脂肪干细胞的成骨基因表达，提高了其成骨能力。