基金项目: 国家自然科学基金(编号：81502123、81673444);;安徽省高校科学研究项目(编号：KJ2019A0234);;出生人口健康教育部重点实验室开放课题(编号：JKZD20212);;抗炎免疫药物教育部重点实验室开放课题(编号：KFJJ-2020-12、KFJJ-2021-09);;皮肤病学教育部重点实验室开放课题(编号：AYPYS2021-2)
作者：关艳玲;章萍萍;陈秀;蒋励萍;魏伟;马旸;
关键词：角质形成细胞;;原代培养;;小鼠表皮;;增殖;;分化
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.06.019
〔摘 要〕 目的 体外分离、培养并鉴定成年小鼠背部皮肤角质形成细胞(KC);对比4种品系小鼠KC的增殖与分化能力。方法 剪取4种品系成年小鼠背部皮肤，剥离皮下脂肪组织，0.25%胰蛋白酶消化获得KC;免疫荧光法鉴定KC;显微镜下观察细胞生长状况；设计不同的种板时间和密度，使用CCK-8法、EdU和高内涵法检测细胞增殖活力；通过Western blot检测4种成年小鼠KC分化情况。结果 对4种品系成年小鼠背部相同面积的皮肤组织进行胰蛋白酶消化，昆明(Kunming, KM)小鼠提取的KC数量最低，C57BL/6提取的细胞数量最多；BALB/c、KM、裸小鼠分别以8×10~3个/孔的密度铺板增殖效率较高，C57BL/6以1.6×10~4个/孔的密度铺板增殖效率较高；4种品系小鼠，BALB/c小鼠原代KC较C57BL/6小鼠原代KC增殖能力弱，分化程度差异无统计学意义。结论 采用简便易行的方法成功分离并比较4种成年小鼠背部皮肤原代KC的增殖和分化能力，为皮肤相关疾病模型小鼠的品系选择提供一定实验依据。