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重组pAd/CMV/V5-DEST-p16质粒的构建

安徽医科大学学报 2006 03 258-261     字体:

基金项目: 安徽省自然基金资助课题(编号:000-44322)

作者:姚彬;胡勇;熊自忠;李旭;

关键词:基因;;p16;;腺病毒科/遗传学;;DNA;;重组

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2006.03.007

〔摘 要〕 目的构建并鉴定pAd/CMV/V5-DEST-p16重组腺病毒质粒。方法合成人p16-INK4表达基因,构建pENTR1A-p16质粒。通过LR反应,入口克隆pENTR1A-p16质粒的外源性合成的修饰后的p16cDNA,取代目的质粒pAd/CMV/V5-DEST中的ccdB基因,形成表达克隆pAd/CMV/V5-DEST-p16,测序证实质粒含有目的基因。结果构建了p16重组腺病毒质粒,为研究p16-INK4的作用创造了条件。结论用通路克隆系统构建重组p16腺病毒质粒稳定、可靠、方便。