基金项目: 江苏省自然科学基金青年项目(BK20210080);;江苏省大学生创新创业训练计划(202010313003Z)
作者:刘雨苗;杨金鑫;朱绍跃;马毓临;夏寒萍;周猛;杨姝蕾;黄泰宁;丁珂欣;刘宗响;
关键词:犬牙周膜细胞;;促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2;;基因转染;;成骨分化
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.03.013
〔摘 要〕 目的 观察促红细胞生成素肝细胞激酶受体B4/促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2(EphB4/ephrinB2)信号通路中过表达ephrinB2在比格犬来源的牙周膜干细胞(cPDLSCs)中成骨分化的能力。方法 采用Beagle犬前磨牙及磨牙中分离PDLSCs,用EfnB2-GFP-Bsd载体和空载体(GFP-Bsd)转染细胞后进行成骨诱导分化,Western blot检测转染后ephrinB2蛋白表达水平,行CCK-8实验、茜素红S染色实验、碱性磷酸酶染色实验(ALP)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测EfnB2-cPDLSCs组、空载体对照组(Vector-cPDLSCs)的成骨分化效果。结果 CCK-8显示:EfnB2-cPDLSCs组和Vector-cPDLSCs组在细胞增殖上没有差异。茜素红染色实验和ALP染色实验证实:EfnB2-cPDLSCs组较Vector-cPDLSCs显示更高的ALP活性和矿化能力。RT-PCR显示:EfnB2-cPDLSCs组成牙本质/成骨标志物的表达高于Vector-cPDLSCs组。结论 通过过表达犬牙周膜细胞中的ephrinB2可提高其成骨分化的能力。