基金项目: 云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目(编号:202005AC160021);;云南省科技厅科技计划项目[编号:2019FE001(-169)]
作者:薛黎萍;胡敏;李亚娣;张晓帆;张洁莹;周园;梁佳芮;张传宏;丁鹏;
关键词:糖尿病视网膜病变;;人参皂苷RG1;;人视网膜微血管内皮细胞;;丙酮酸激酶M2;;糖酵解;;血管形成
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.10.009
〔摘 要〕 目的 探讨人参皂苷Rg1(GRg1)通过调控丙酮酸激酶M2(PKM2)的表达对人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)糖酵解的影响。方法 在体外培养HRMECs,将其分为对照组(NC)组、高葡萄糖(HG)组、HG+人参皂苷Rg1(HG+GRg1)组、HG+人参皂苷Rg1+低表达PKM2(HG+GRg1+si-PKM2)组、HG+人参皂苷Rg1+过表达PKM2(HG+GRg1+OE-PKM2)组,si-PKM2、OE-PKM2通过细胞转染方式转染至HRMECs中。采用qRT-PCR法检测HRMECs中PKM2 mRNA的表达情况;通过Western blot检测HRMECs中相关蛋白表达量;在倒置显微镜下观察细胞体外管腔生成数量,以量化血管形成能力;收集各组细胞培养液,分别用葡萄糖检测试剂盒、乳酸检测试剂盒和腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)检测试剂盒检测葡萄糖摄取量、乳酸产量以及ATP含量。结果 HG诱导会显著增加HRMECs的血管形成数量、糖酵解及PKM2的表达,而在加入GRg1处理后,HG所致的血管数量、糖酵解及PKM2的表达均明显减少;转染si-PKM2可协助GRg1对糖酵解和血管形成的抑制作用,而转染OE-PKM2会干扰GRg1的功能。结论 GRg1通过抑制PKM2减少HRMECs糖酵解抑制血管形成。