基金项目: 四川省科技计划项目(编号2023NSFSC0124); 四川省自贡市科技计划项目(编号2023YKY11、2023-NKY-02-13、2023-NKY-02-14);四川省自贡市卫生健康委员会科研课题(编号22yb001);
作者:刘宇;刘召平;蒲建林;向波;刘可智;蔡端芳;邬建飞;
关键词:C57小鼠;昼夜节律紊乱;抑郁症;下丘脑;睾丸;
DOI:DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.10.015
〔摘 要〕 目的 探讨昼夜节律紊乱(CRD)对青少年小鼠下丘脑神经元变化和睾丸功能的影响。方法 选取30只SPF级1月龄C57雄性小鼠,随机分为Control组和CRD组,每组15只,Control组保持12 h暗/12 h明的循环光照,CRD组保持24 h光照,造模共计61 d。统计各组小鼠的生长曲线;利用高架十字迷宫和旷场实验检测小鼠行为变化;利用尼氏染色检测神经元形态;利用免疫荧光染色和Western blot技术检测离子钙结合适配器分子1 (Iba1)和神经元特异性核蛋白(NeuN)在下丘脑的分布和表达;利用RT-qPCR检测睾酮合成相关基因类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)和3β-羟基类固醇脱氢酶-1 (HSD3B1)以及生精相关基因配子生成素结合蛋白2(GGNBP2)和无精症缺失样(DAZL)在睾丸中的表达情况。结果 在第61天时,CRD组小鼠体质量显著高于Control组。高架十字迷宫中,CRD组小鼠进入开臂时间、开臂次数和开臂时间百分比都显著少于Control组小鼠;旷场测试中,CRD组小鼠在中心区停留时间和进入中心区频率都显著少于Control组小鼠。尼氏染色结果显示CRD组小鼠下丘脑阳性细胞数量显著少于Control组小鼠;免疫荧光和Western blot结果显示CRD组小鼠下丘脑的Iba1蛋白表达上调,NeuN蛋白表达下调。RT-qPCR结果显示CRD组小鼠睾丸中HSD3B1的表达显著低于Control组小鼠,GNBP2和DAZL的表达显著低于Control组小鼠。结论 CRD处理不仅会导致青少年小鼠出现焦虑抑郁样行为,同时还会降低雄性青少年小鼠生精能力。