〔摘　要〕 目的 探究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)抑制剂(S,R)-3-(4-羟苯基)4,5-二氢-5-异噁唑乙酸甲酯(ISO-1)对脓毒症诱导的急性肾损伤(AKI)的作用及相关机制。方法 将人肾小管上皮细胞系HK-2分为Con组(不做任何处理),ISO-1组(10μg/ml ISO-1处理24 h),LPS组(10μ/ml LPS处理24 h),LPS+ISO-1组(10μg/ml LPS处理24 h后加入10μg/ml ISO-1处理24 h)。ELSIA检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)含量;6-羧基-2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光指示剂(DCFH-DA)法检测细胞中活性氧(ROS)含量变化,TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1 (Keap1)、血红素加氧酶1(HO-1)和凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因产物(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)及裂解型半胱氨酸蛋白酶-3(c-caspase-3)的表达。采用盲肠结扎穿刺法(CLP)建立脓毒症小鼠模型,分为假手术(Sham)组,ISO-1对照(ISO-1)组,盲肠结扎穿刺(CLP)组和ISO-1治疗(CLP+ISO-1)组。实验结束后,取小鼠肾组织进行HE染色观察各组小鼠肾组织病理改变,检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和肾组织中髓过氧化酶(MPO)含量、谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并通过Western blot检测肾组织中上述MIF因子和Nrf2/Keap1信号通路和凋亡相关蛋白的表达。结果 与Con组相比,LPS组和LPS+ISO-1组HK-2细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6含量、TUNEL阳性率和细胞中ROS含量及Keap1、Bax与c-Caspase-3的蛋白表达均升高(P<0.05),而Nrf2、HO-1和Bcl-2蛋白降低(P <0.05);ISO-1组无明显变化(P> 0.05)。与LPS组相比,LPS+IS0-1组细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6含量、TUNEL阳性率和细胞中ROS含量及Keap1、Bax与c-Caspase-3的蛋白表达均降低(P <0.05),而Nrf2、HO-1和Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。小鼠实验结果显示,与Sham组相比,CLP组与CLP+ISO-1组小鼠肾组织损伤严重,血清BUN、Scr含量及肾组织中MIF、Keap1、Bax与c-Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),而GSH、SOD活性及Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);ISO-1组无明显变化(P>0.05);与CLP组相比,CLP+ISO-1组上述指标改善(P<0.05)。结论 MIF特异性抑制剂ISO-1可能在体内外通过Nrf2/Keap1信号通路抑制氧化应激、炎症反应和细胞凋亡,改善脓毒症诱导的AKI。