基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:81972472);;安徽医科大学基础与临床合作研究提升计划资助项目(编号:2020xkjT012)~~
作者:王娟如;宋巧稚;刘晓利;吴正升;
关键词:3D培养;;共培养;;核-壳微胶囊;;肿瘤微环境;;化疗耐药
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.11.016
〔摘 要〕 目的 利用液滴微流控技术构建3D微肿瘤模型来模拟肿瘤微环境。通过3D微肿瘤的制造、表征和对化疗药物的敏感性测试,探究其作为体外乳腺癌研究模型的可行性。方法 将人乳腺癌细胞用水凝胶壳封装在富含胶原蛋白的微胶囊核心中,获得体外乳腺癌微肿瘤;将乳腺癌微肿瘤通过Transwell系统与3D微胶囊化的内皮细胞进行共培养。通过显微镜直接观察微肿瘤的结构和生长特征;采用CCK-8实验检测不同培养模型下细胞的增殖情况以及对阿霉素的药物敏感性;采用流式细胞术比较增殖过程细胞凋亡的差异;采用划痕实验和Transwell实验评估细胞迁移和侵袭能力的差异;采用Western blot法检测细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达。结果 乳腺癌细胞在水凝胶核-壳微胶囊中生长良好;细胞增殖实验结果显示,3D培养和3D共培养细胞增殖速度显著低于2D培养;与2D培养相比,3D培养和3D共培养细胞迁移和侵袭能力增强并显示出更高的EMT相关蛋白表达;与2D培养相比,3D培养和3D共培养细胞对化疗药物的敏感性显著降低。结论 3D培养表现出与体内肿瘤相似的形态结构和生物学特征且对化疗药物耐药性更高。