〔摘　要〕 目的 运用浓度倍增的铁死亡诱导剂Erastin和RAS选择性致死分子3（RSL3）体外诱导肝癌细胞，并构建体外肝癌铁死亡模型，为开发针对肝癌的新型治疗策略提供理论依据。方法 以浓度倍增的Erastin（0～40μmol/L）和RSL3（0～10μmol/L）分别干预对数生长期肝癌细胞（HCCLM3、HepG2、Hep3B、Huh7和PLC/PRF/5）,24h后运用CCK 8法检测细胞活力，绘制生长曲线，计算半抑制浓度(IC₅₀)，选择对诱导剂敏感的肝癌细胞进行后续实验。光镜下观察诱导剂对细胞状态的影响；通过免疫印迹技术和流式细胞术验证体外铁死亡模型是否构建成功。结果 在5种肝癌细胞中，Huh7、Hep3B和HepG2细胞对铁死亡诱导剂Erastin和RSL3较为敏感，HCCLM3和PLC/PRF/5对Erastin和RSL3不敏感，当Erastin和RSL3的浓度达最大时，存活率仍有65%以上。因此，选择Huh7、Hep3B和HepG2细胞用于后续实验。分别按照Erastin和RSL3浓度梯度干预肝癌细胞，与对照组比较，铁死亡标志分子谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）表达量随着Erastin和RSL3的浓度依赖性下调。在Huh7、Hep3B和HepG2细胞中，分别用10μmol/L和20μmol/LErastin作用24h后脂质活性氧（ROS）水平与对照组比较，显著增加；在Huh7细胞中，分别用0.5μmol/L和1μmol/LRSL3作用24h后的脂质ROS水平与对照组比较，显著增加；在Hep3B和HepG2细胞中，分别用1μmol/L和2μmol/LRSL3作用24h后的脂质ROS水平与对照组比较，显著增加。结论Huh7、Hep3B和HepG2细胞对Erastin和RSL3敏感性高。10μmol/LErastin作用24h处理Huh7、Hep3B和HepG2细胞是体外模拟Erastin诱导肝癌铁死亡的良好模型；0.5μmol/LRSL3作用24h处理Huh7细胞以及1μmol/LRSL3作用24h处理Hep3B和HepG2细胞是体外模拟RSL3诱导肝癌铁死亡的良好模型。