基金项目: 国家自然科学基金(编号:81801831、82072055);;安徽高校自然科学研究计划(编号:KJ2019A0278);;安徽高校优秀青年人才支持计划(编号:gxyqZD2019018)
作者:杨荷宇;张力;闻慧琴;温诚浩;王辉;梁朝朝;
关键词:肾癌;;铁酸锌磁性纳米颗粒;;活性氧;;自噬
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.08.004
〔摘 要〕 目的探讨铁酸锌磁性纳米颗粒(ZF NPs)对肾癌细胞(Caki-1)的杀伤效应及其与活性氧(ROS)和自噬的相关性。方法采用水相法合成ZF NPs,使用透射电子显微镜(TEM)等方法对ZF NPs进行表征测试;噻唑兰(MTT)法检测ZF NPs对Caki-1细胞的生长抑制作用;DCFH-DA染色检测不同处理组细胞内ROS水平;TEM观察ZF NPs能否诱导Caki-1细胞产生自噬泡;Western blot检测不同处理组细胞自噬强度的变化;DCFH-DA染色、MTT及Western blot探究ZF NPs杀伤Caki-1细胞过程中诱导ROS与自噬的调控机制。结果尺寸、形貌均一的ZF NPs具备可用于MRI的顺磁性。ZF NPs对Caki-1细胞具有剂量及时间依赖性杀伤效应,在此过程中,ZF NPs以剂量及时间依赖的方式诱导Caki-1细胞产生ROS,而N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)可减少ROS的积累,并减弱ZF NPs的杀伤效应。ZF NPs亦可诱导Caki-1细胞产生自噬,渥曼青霉素可抑制ZF NPs引起的微管相关蛋白1轻链3-二型(LC3-Ⅱ)蛋白积累,并减弱ZF NPs的杀伤效果。ZF NPs与海藻糖联用则会诱导更强的肿瘤杀伤效应,机制为海藻糖可增加ZF NPs杀伤Caki-1细胞过程中ROS的积累及促死亡自噬的强度。在此过程中,NAC抑制ROS可减弱ZF NPs诱导的自噬强度,渥曼青霉素抑制自噬亦可减少ROS的积累。结论 ZF NPs具备成为MRI造影剂的潜力,并可诱导ROS及促死亡自噬交互调控杀伤Caki-1细胞。