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人G蛋白偶联受体107表达载体构建及细胞定位的研究

安徽医科大学学报 2021 07 v.56 1012-1015     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81772909)

作者:冯阳;贺凡;涂珍珍;臧丹丹;倪鸣岳;周海胜;

关键词:GPR107;;表达;;转染;;亚细胞定位

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.07.002

〔摘 要〕 目的克隆人G蛋白偶联受体107(GPR107)基因以构建真核表达载体,并探讨GPR107在真核细胞中的亚细胞定位。方法通过分子克隆技术克隆人GPR107基因的cDNA;利用真核细胞表达载体pCMV-Tag2B构建重组载体pCMV-Tag2B-GPR107,瞬时转染至293T细胞,Western blot检测GPR107的表达变化;采用免疫荧光标记,激光共聚焦显微镜观察GPR107在细胞中的定位。结果经过基因测序证实获得人GPR107的cDNA;成功构建真核表达载体pCMV-Tag2B-GPR107;Western blot结果显示,与未转染组比较,转染组GPR107表达量明显上调。激光共聚焦显微镜观察显示GPR107主要表达于细胞质。结论 GPR107在293T细胞中过表达,并定位于细胞质。