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肝细胞内相关mRNA抑制HBV复制与表达的功能验证

安徽医科大学学报 2021 05 v.56 779-785     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81660827、81860889);;中国博士后科学基金面上资助项目(编号:2019M653312);;广西重点研发计划项目(编号:2017AB45166);;第二批广西高层次骨干人才培养139计划(编号:桂卫科教发[2018]22号)

作者:黄鹏;邱华;范春娇;毛德文;李旺;蒙荫杰;何锦轶;

关键词:乙型肝炎病毒;;信使核糖核酸;;肝细胞;;慢病毒转染技术

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.05.020

〔摘 要〕 目的验证肝细胞内抑制乙型肝炎病毒(HBV)复制与表达的相关mRNA。方法通过慢病毒介导的方式将过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、核因子I/B(NFIB)及白细胞介素-8(IL-8)基因转入HepG2.2.15及HBV全基因组1.3倍体HepG2(HBV1.3P-HepG2)细胞模型中,以空白对照(NC)组为对照,转染48 h后采用qPCR检测mRNA表达及HBV DNA复制水平,化学发光法检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg的表达,免疫荧光法检测细胞内HBsAg的表达。结果在HepG2.2.15和HBV1.3P-HepG2细胞模型中,PPARα能够促进HBV DNA复制和HBsAg表达,其HBV DNA的表达分别是NC组的1.46倍和1.27倍(P<0.05)。NFIB可以抑制HBV DNA复制和HBsAg表达,其HBV DNA的表达分别是NC组的0.76和0.55倍(P<0.05)。IL-8能够促进HBV DNA复制和HBsAg表达,其HBV DNA的表达分别是NC组的1.54倍和1.62倍(P<0.05)。结论肝细胞内PPARα和IL-8能够促进HBV复制与表达,NFIB可以抑制HBV复制与表达,可为后续研究提供实验室依据。