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基因干扰lncRNA SPRY4-IT1对GBC-SD细胞干样性及线粒体膜电位的影响

安徽医科大学学报 2021 03 v.56 369-374     字体:

基金项目: 河南省医学科技攻关计划项目(编号:2018020934)

作者:李辰;王庆治;歧红阳;毛建娜;魏小娟;王鹏立;董志超;

关键词:lncRNA SPRY4-IT1;;胆囊癌;;干细胞样特性;;线粒体膜电位

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.03.007

〔摘 要〕 目的通过基因干扰长链非编码RNA(lncRNAs) SPRY4-IT1,探究其对胆囊癌(GBC)细胞GBC-SD肿瘤干细胞样特性及线粒体膜电位变化的影响。方法设计合成SPRY4-IT1 shRNA,将shRNA-SPRY4-IT1转染GBC-SD细胞,RT-PCR检测SPRY4-IT1的表达水平;BrdU染色检测细胞增殖;流式检测细胞凋亡;肿瘤细胞成球实验检测肿瘤干细胞样特性;流式检测线粒体膜电位的变化;Western blot检测肿瘤干样特性标志物以及线粒体损伤标志物的蛋白表达。结果将shRNA-SPRY4-IT1转染GBC-SD细胞,SPRY4-IT1的表达水平降低。干扰SPRY4-IT1表达抑制GBC-SD细胞增殖;提高线粒体膜电位,促进GBC-SD细胞凋亡;降低GBC干细胞样特性;抑制SOX2, OCT4, CD44, c-Myc和Bcl-2的表达以及促进cleaved Caspase-3, cleaved Caspase-9和Bax的表达。结论基因干扰lncRNAs SPRY4-IT1能降低GBC细胞GBC-SD肿瘤干细胞特性,提高线粒体膜电位,促进GBC细胞GBC-SD的凋亡。