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长链非编码RNA PCAT-1对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制研究

安徽医科大学学报 2021 03 v.56 428-433     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81870096)

作者:王继军;吴凡;李瑶瑶;孔桂美;郁多男;

关键词:胰腺癌;;长链非编码RNA前列腺癌相关转录本1;;增殖;;凋亡;;PI3K/AKT

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.03.018

〔摘 要〕 目的研究长链非编码RNA前列腺癌相关转录本1(lncRNA PCAT-1)对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法qRT-PCR检测lncRNA PCAT-1在胰腺癌细胞系Capan-1、Capan-2、PANC-1、SW1990和正常胰腺细胞hTERT-HPNE中的表达水平。lncRNA PCAT-1表达最高的胰腺癌细胞系分为sh-NC组和sh-PCAT-1组,进行NC干扰慢病毒(shRNA)和PCAT-1 shRNA感染,qRT-PCR检测各组细胞中lncRNA PCAT-1的表达水平。3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓(MTS)实验检测沉默lncRNA PCAT-1的表达对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测沉默lncRNA PCAT-1的表达对细胞周期和凋亡的影响;皮下移植瘤实验检测沉默lncRNA PCAT-1的表达对胰腺癌细胞体内生长能力的影响;Western blot检测lncRNA PCAT-1对细胞周期相关蛋白、凋亡相关蛋白和PI3K/AKT信号通路关键蛋白的表达影响。结果qRT-PCR检测结果显示lncRNA PCAT-1在胰腺癌细胞系的表达水平高于在正常胰腺细胞hTERT-HPNE中的表达(P<0.05),与Capan-1、Capan-2和SW1990细胞相比,PANC-1细胞中lncRNA PCAT-1的表达最高。PANC-1细胞感染PCAT-1 shRNA,qRT-PCR结果显示,与sh-NC组相比,sh-PCAT-1组细胞中lncRNA PCAT-1的表达降低(P<0.05);沉默lncRNA PCAT-1的表达后,PANC-1细胞的增殖能力降低,细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增加,细胞体内裸鼠成瘤能力降低,细胞周期蛋白cyclinD1和CDK6蛋白的表达减少,抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白减少,促凋亡蛋白Bax蛋白表达增加,PI3K/AKT信号通路关键蛋白pPI3K和pPAKT蛋白表达减少。结论沉默lncRNA PCAT-1的表达可能通过调控PI3K/AKT信号通路抑制胰腺癌细胞增殖和促进细胞凋亡。lncRNA PCAT-1可能是治疗胰腺癌的新型靶标。