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干扰长链非编码RNA CCAT2对膀胱癌细胞J82线粒体功能和肿瘤干细胞样特性的影响

安徽医科大学学报 2021 02 v.56 221-226     字体:

基金项目: 陕西省重点研发计划项目(编号:2020SF-123)

作者:白晓静;蒋玉梅;张静;范晋海;

关键词:膀胱瘤;;长链非编码RNA;;CCAT2;;线粒体功能;;肿瘤干细胞

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.02.010

〔摘 要〕 目的探讨干扰长链非编码RNA CCAT2(lncRNA CCAT2)对膀胱癌细胞J82线粒体功能、肿瘤干细胞样特性的影响。方法通过构建lncRNA CCAT2短发卡RNA(shRNA)干扰CCAT2表达,RT-PCR验证并选择其中CCAT2表达量最低的J82细胞系用于后续实验。克隆形成检测细胞增殖、流式细胞仪检测线粒体膜电位变化情况,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白水平,显微下观察肿瘤细胞成球情况,流式细胞仪检测各组细胞CD133的表达,Western blot检测OCT4、SOX2、CD44水平。结果三种CCAT2-shRNA J82细胞系中的CCAT2表达量均低于shRNA-NC(P<0.05);CCAT2-shRNA组克隆形成率、c-Myc水平、肿瘤成球直径及成球率、CD133阳性细胞数、OCT4、SOX2、CD44水平低于shRNA-NC组(P<0.05),绿色荧光强度、Bax/Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9水平均高于shRNA-NC组(P<0.05)。结论下调lncRNA CCAT2表达量可以抑制J82细胞生长,可能与影响细胞线粒体功能以及肿瘤干细胞样特性有关。