安徽医科大学学报
2021 02 v.56 326-332
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基金项目: 国家自然科学基金(编号:81501187);;安徽省自然科学基金(编号:1508085QH173);;中国科学院脑功能与脑疾病重点实验室开放基金(编号:201601)
作者：彭丽朵;代雅倩;徐元宏;吴丹丹;江桃山;乔金平;
关键词：基于质谱的受体结合分析方法;;液相色谱-质谱联用;;Aβ分子探针;;阿尔茨海默病
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.02.029
〔摘 要〕 建立基于质谱的受体结合分析方法(MSBA),测定小分子探针与淀粉样蛋白-β(Aβ)聚集体的亲和力。针对阳性探针IMPY及其氘代产物IMPY-D_6建立液相色谱-质谱(LC-MS)联用方法和定量方法,随后进行基于质谱的饱和结合实验及竞争结合实验,最后将结果与文献中放射性受体结合实验结果进行比较。成功建立了IMPY的LC-MS方法及基于质谱的受体结合测定方法。其中,饱和结合实验中IMPY与Aβ1-40及Aβ1-42的K_d分别为(3.80±0.39) nmol/L和(18.38±1.11) nmol/L。竞争结合实验中IMPY与Aβ1-40及Aβ1-42的K_i分别为(18.64±0.76) nmol/L和(25.44±2.38) nmol/L。均与文献中放射性受体结合实验结果基本一致。MSBA作为一种非放射性结合实验方法,测定结果与放射性受体结合实验基本一致,可用于小分子探针与Aβ的亲和力的测定,该技术平台可拓展至用于常规小分子配体与受体亲和力的测定。