〔摘　要〕 目的 探讨含OTU结构域的泛素醛结合蛋白2(OTUB2)影响RNA解螺旋酶54(DDX54)的活性及其对中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的形成和结直肠癌(CRC)细胞活力、侵袭的影响。方法 分离CRC患者和健康对照组的外周血中性粒细胞，并使用佛波酯(PMA)或脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)刺激中性粒细胞4 h; Western blot检测NETs标记物髓过氧化物酶(MPO)和瓜氨酸组蛋白H3(Cit-H3)的表达；干预SW480细胞中OTUB2或DDX54的表达并将其和中性粒细胞共培养，细胞分为如下组：对照组(不做任何处理),NETs组、vector组、OTUB2组、NETs+si-OTUB2组(SW480细胞、转染了vector、OTUB2过表达质粒和si-OTUB2的SW480细胞分别与PMA处理的中性粒细胞共培养),OTUB2+DNaseⅠ组(转染了OTUB2过表达质粒的SW480细胞与DNaseⅠ处理的中性粒细胞共培养),si-OTUB2组、OTUB2+si-NC组和OTUB2+si-DDX54组(转染了si-OTUB2、OTUB2过表达质粒和si-NC、OTUB2过表达质粒和si-DDX54的SW480细胞分别与中性粒细胞共培养)。ELISA检测SW480细胞上清液中MPO-DNA复合物相对表达量和Cit-H3的浓度；MTT和Transwell检测SW480细胞活力和侵袭能力；RNA测序筛选OTUB2调控的下游基因并使用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）、免疫共沉淀（co-IP）和谷胱甘肽S-转移酶（GST）亲和纯化（GST-pulldown）、His-tagpull-down实验验证DDX54和OTUB2的相互作用。结果 与健康对照相比，CRC患者外周血中NETs的形成增加。与对照组相比，NETs组CRC细胞活力和侵袭增加（P<0.05）。与vector组比较，OTUB2组MPO-DNA复合物相对表达量和Cit-H3的浓度增加，细胞活力和侵袭增加（P<0.05）；而与OTUB2组比较，OTUB2+DNaseⅠ组MPODNA复合物相对表达量和Cit-H3的浓度减少，细胞活力和侵袭减少（P<0.05）。Co-IP实验、GSTpulldown实验和His-tagpulldown实验表明OTUB2和DDX54之间存在相互作用。与OTUB2+si-NC组比较，OTUB2+si-DDX54组MPO-DNA复合物相对表达量和Cit-H3的浓度减少，细胞活力和侵袭减少（P<0.05）。结论 去泛素化酶OTUB2可以通过上调DDX54的增加NETs的形成并促进CRC细胞活力和侵袭。