基金项目: 国家自然科学基金(编号:82060241、82260387);;云南省科技厅计划项目(编号:202101AY070001-002);;昆明医科大学研究生创新基金(编号:2023S133)
作者:李佳丽;曹艳;凌腾晗;尹爱平;李恒希;李经辉;张瑞林;吴海鹰;李坪;
关键词:大麻二酚;;创伤性脑损伤;;血脑屏障;;紧密连接蛋白;;大鼠;;闭合蛋白;;闭锁小带蛋白1
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.03.017
〔摘 要〕 目的 观察创伤性脑损伤(TBI)大鼠血脑屏障(BBB)中紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)的表达及变化趋势,探讨大麻二酚(CBD)对BBB的干预作用。方法 采用改良Feeney自由落体法制备大鼠TBI模型,将大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、模型组(TBI+vehicle组)和CBD干预组(TBI+CBD组),每组24只;每个组又分为损伤后8 h、1、2、3、5和7 d共6个时间点,通过免疫组化和免疫荧光染色,Western blot检测与BBB通透性密切相关的Occludin和ZO-1在不同时间点的表达情况;通过荧光素钠实验检测BBB通透性。结果 免疫组化实验结果表明,与假手术组相比,TBI后随着时间推移Occludin和ZO-1蛋白阳性表达减少(P<0.05),2d达到最低;CBD干预1d后Occludin和ZO-1蛋白表达水平均上调(P<0.05);免疫荧光染色实验与Westernblot结果趋势近似,与假手术组相比,TBI后Occludin和ZO-1荧光表达强度及蛋白表达量减少(P<0.05),CBD干预2d后Occludin和ZO-1表达水平上调(P<0.05);荧光素钠实验结果表明,TBI后脑组织BBB完整性遭到破坏,通透性升高(P<0.01),CBD干预后BBB通透性下降(P<0.05)。结论 TBI后紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达下降,BBB通透性升高,CBD干预可逆转TBI对BBB的破坏。