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卡波肉瘤相关疱疹病毒细胞抗原片的制备

安徽医科大学学报 2020 10 v.55 1541-1545     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81271837);;安徽省自然科学基金(编号:1708085MH193);;2019年度安徽医科大学科研基金(编号:2019xkj020)

作者:文志;周畅;华玮;董凯旋;叶磊;郑豪;徐涵;王林定;

关键词:卡波肉瘤相关疱疹病毒;;LANA;;细胞抗原片;;免疫荧光

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.10.012

〔摘 要〕 目的成功制备了卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)的细胞抗原片,并验证其有效性,为检测KSHV血清标本提供了一种可行的办法。方法培养了能够稳定表达卡波肉瘤相关疱疹病毒核相关抗原(LANA)的BCBL-1细胞。BCBL-1细胞是感染过KSHV并且细胞基因组中包含KSHV基因的细胞。待细胞生长活力旺盛且状态良好时,收集细胞并用4%的多聚甲醛固定到预先处理好的抗原片上,完成封闭、待测血清的孵育和荧光二抗的孵育后,通过免疫荧光显微镜观察检测结果。结果通过免疫荧光技术发现,感染过KSHV的患者血清样本能观察到荧光标记的二抗激发的荧光,而未感染过KSHV的标本则没有观察到荧光标记的二抗激发的荧光。结论成功制备了能用于检测血清的卡波肉瘤相关疱疹病毒的细胞抗原片,为进一步研究卡波肉瘤相关疱疹病毒的流行病学提供方法。