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小鼠骨髓源肥大细胞外泌体对肝癌Hepa1-6细胞增殖、迁移和侵袭的影响

安徽医科大学学报 2020 09 v.55 1394-1399     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:31741087);;上海浦江人才计划项目(编号:18PJ1409300)

作者:王小冬;杨木清;刘斌;邓现语;刘颖;音洋洋;李济宇;

关键词:肥大细胞;;肝癌细胞;;外泌体;;增殖;;迁移;;侵袭

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.09.015

〔摘 要〕 目的探讨小鼠骨髓源肥大细胞外泌体对肝癌Hepa1-6细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法使用IL-3和SCF细胞因子体外培养小鼠骨髓源肥大细胞,通过甲苯胺蓝染色、免疫荧光和流式细胞检测鉴定。超速离心法提取肥大细胞外泌体,通过透射电镜、粒径分析和Western blot检测外泌体的形态、直径和标志蛋白。用不同浓度的外泌体(5、10、20μg/ml)处理肝癌Hepa1-6细胞,采用CCK-8实验、Edu实验、划痕实验和Transwell实验分析其对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果骨髓源肥大细胞外泌体呈圆形或椭圆形,粒径大多在30~150 nm,表达外泌体标志蛋白CD63、Alix和TSG101。CCK-8和Edu实验结果示肥大细胞外泌体能够促进Hepa1-6细胞的增殖,且其促进作用具有浓度依赖性;划痕实验结果示肥大细胞外泌体可增强Hepa1-6细胞的迁移能力;Transwell实验结果示肥大细胞外泌体能够提高Hepa1-6细胞的侵袭能力。结论骨髓源肥大细胞外泌体能够促进肝癌Hepa1-6细胞增殖、迁移和侵袭。