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人参皂苷Rb1抑制利多卡因诱导小鼠原代脊髓神经干细胞损伤研究

安徽医科大学学报 2020 09 v.55 1332-1338     字体:

基金项目: 河南省科技计划项目(编号:152300410177);;漯河市科技创新项目(编号:20181000008)

作者:杨常青;韩芳芳;袁菲;徐松涛;陈旭东;

关键词:利多卡因;;神经干细胞;;凋亡;;人参皂苷Rb1

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.09.004

〔摘 要〕 目的探讨人参皂苷Rb1对利多卡因引起的神经干细胞损伤的影响及作用机制。方法使用抗Nestin抗体、抗CD133抗体对原代神经细胞进行标记,采用流式细胞仪根据分步分选出神经干细胞,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及免疫荧光染色法检验其干细胞特性。分别利用含有利多卡因或人参皂苷Rb1的培养液培养分离出的神经干细胞,使用RT-qPCR和Western blot检测利多卡因或Rb1对神经干细胞c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路分子及细胞凋亡相关分子表达的影响。利用利多卡因和Rb1共培养神经干细胞,并检验Rb1对利多卡因诱导的神经干细胞凋亡的影响。结果通过两步筛选,获得了较高纯度的脊髓神经干细胞。该干细胞表达神经干细胞的标记基因SOX2,并能够向相关神经细胞分化。利多卡因能够激活JNK信号通路并诱导神经干细胞的凋亡,而人参皂苷Rb1能够抑制JNK信号通路的激活并能够部分回复利多卡因处理诱导的神经干细胞凋亡。结论人参皂苷Rb1能够抑制利多卡因处理激活的JNK信号通路并回复由利多卡因处理引起的脊髓神经干细胞凋亡。