基金项目: 国家自然科学基金(编号:81603121、81673444、81973332);;安徽医科大学博士科研资助基金(编号:XJ201629)
作者:胡晓曦;张爱君;张静;吴育晶;魏伟;
关键词:免疫球蛋白D;;CD4~+T细胞;;CD19~+B细胞;;共培养;;类风湿性关节
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.04.017
〔摘 要〕 目的研究免疫球蛋白D(IgD)通过人T细胞上的IgD受体(IgDR)-淋巴细胞特异性酪氨酸激酶(Lck)信号活化T细胞的功能以及对B细胞活化的影响。方法收集健康对照者和类风湿关节炎(RA)患者的外周血,通过流式分选技术分选出外周血单个核细胞(PBMCs)中的CD4~+T细胞和CD19~+B细胞,将不同浓度IgD刺激的CD4~+T细胞与CD19~+B细胞利用transwell小室进行共培养后,激光共聚焦显微镜观察CD4~+T细胞上Lck与IgDR的共定位,Western blot法检测CD4~+T细胞上P-Lck和CD40L蛋白的表达、CD19~+B细胞上CD40蛋白的表达,CCK-8法检测IgD刺激的T细胞对B细胞活化的影响。结果 IgD可显著上调健康对照者CD4~+T细胞上Lck与IgDR两种蛋白的共表达及P-Lck蛋白的表达;在健康对照者和RA患者中,IgD刺激的T细胞可诱导B细胞的活化;IgD可显著上调CD40L蛋白在CD4~+T细胞上的表达以及CD40蛋白在CD19~+B细胞上的表达。结论 IgD可通过IgDR-Lck信号活化T细胞,并通过上调T-B共刺激分子CD40L和CD40的蛋白表达刺激B细胞的活化。