基金项目: 国家自然科学基金(编号:81171173)
作者:朱思斌;张雪;江飞;许易诚;尹宗生;
关键词:胰岛素样生长因子6;;脂肪干细胞;;成骨分化
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.12.015
〔摘 要〕 目的探讨胰岛素样生长因子(IGF-1)对兔脂肪干细胞(ADSCs)增殖和成骨分化的影响。方法无菌条件下从兔颈后部取出脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化法将ADSCs从脂肪组织中分离,观察细胞生长。采用免疫荧光法检测ADSCs表面特异性标志物CD90。P_3代ADSCs在成脂和成骨诱导培养液的诱导下向成脂和成骨方向分化,油红O、茜素红染色定性鉴定。在成骨诱导培养基中加入IGF-1,设置培养基IGF-1浓度为0、5、10、20 ng/ml四组,观察不同浓度IGF-1对ADSCs增殖活性、碱性磷酸酶(ALP)和钙离子含量的影响。CCK-8法检测各组ADSCs的增殖活性,茜素红染色定性检测各组ADSCs的成骨分化能力;通过测定ALP和钙离子含量定量检测各组ADSCs成骨分化能力。结果原代及传代的兔ADSCs均呈长梭形或成纤维细胞样外观,生长分化活跃。免疫荧光检测ADSCs高度表达表面特异蛋白CD90,培养的细胞具有成骨分化和成脂分化的能力。IGF-1可以促进ADSCs增殖活性和提高ADSCs的ALP、钙离子含量。IGF-1浓度越高,ADSCs增殖活性和ALP、钙离子含量越高。结论 IGF-1可以促进兔ADSCs的增殖与成骨分化。