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人血小板裂解液在人牙髓间充质细胞体外增殖与分化中的应用

安徽医科大学学报 2019 10 v.54 1551-1556     字体:

基金项目: 安医大安科生物校企合作项目(编号:K2015011);;安徽高校自然科学研究项目(编号:KJ2017ZD17)

作者:谢贤哲;徐燕;何家林;王腾飞;霍冬梅;

关键词:血小板;;裂解液;;牙髓组织;;细胞培养;;成骨分化

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.10.011

〔摘 要〕 目的探索人血小板裂解液(HPL)在人牙髓间充质细胞(hDPSCs)体外培养及成骨分化中的作用,为HPL代替胎牛血清(FBS)提供依据。方法分别使用不同浓度HPL与10%FBS对牙髓组织原代培养。倒置荧光显微镜及扫描电镜观察细胞生长状态,计算细胞培养成活率;流式细胞术检测间充质细胞特异性表面抗原表达;细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况;台盼蓝染色检测细胞活性;实时荧光聚合酶链式反应(Q-PCR)检测成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的表达;茜素红染色检测细胞体外成骨能力。结果两组均有成纤维细胞样细胞从组织块中爬出,流式细胞术检测结果显示其符合间充质来源干细胞的表型特征;10%HPL组hDPSCs增殖速度最快且成骨能力优于10%FBS组(P<0.05)。结论适宜浓度的HPL可以支持hDPSCs的体外增殖并促进成骨分化。