基金项目: 国家自然科学基金(编号:81570403);;安徽省“十三五”医疗卫生重点专科建设项目;;滁州市科技指导性计划项目(编号:201507)
作者：陈良余;毛雨;周扬;费亮;王健;周利民;范涛涛;沈兵;
关键词：大电导钙激活钾通道;;瞬时受体电位通道;;血管平滑肌;;内皮素1;;TRPC
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.10.001
〔摘 要〕 目的研究胸主动脉平滑肌瞬时受体电位离子通道(TRPC)家族C1/C4/C5三个亚型与大电导钙激活钾通道(BK_(Ca))蛋白相互作用差异,阐明TRPC1/C4/C5通道在激动剂引起的胸主动脉平滑肌收缩中的作用。方法采用瞬时转染小干扰RNA(siRNA)敲低昆明小鼠胸主动脉平滑肌组织中TRPC1、TRPC4、TRPC5蛋白表达并用免疫蛋白印迹实验检测其表达水平改变情况;通过离体血管实验检测内皮素1引起的血管收缩改变;采用免疫共沉淀实验检测TRPC1/C4/C5通道蛋白与BK_(Ca)蛋白相互作用情况。结果瞬时转染特异性TRPC1/C4/C5 siRNA显著敲低昆明小鼠胸主动脉平滑肌中TRPC1/C4/C5蛋白表达;在内皮素1引起的胸主动脉环收缩中,TRPC1或TRPC5 siRNA处理组较对照组血管收缩显著增强,但TRPC4 siRNA处理组较对照组血管收缩显著减弱;免疫共沉淀结果显示,TRPC1可以共沉淀TRPC4、TRPC5和BK_(Ca),同时,TRPC4可以共沉淀TRPC1,TRPC5可以共沉淀TRPC1、BK_(Ca),但TRPC4不能共沉淀BK_(Ca)。结论 TRPC1可以与TRPC4或TRPC5蛋白在小鼠胸主动脉平滑肌中组成异聚体通道,并且TRPC1-TRPC5两种蛋白组成的异聚体通道和BK_(Ca)形成钙信号复合物调节血管平滑肌收缩。