基金项目: 国家自然科学基金(编号:21572003)
作者:鲁梅芳;黄浩;刘小艳;陈刘赠;刘新华;李洪;
关键词:肌腱蛋白C;;ITGB7;;锚定非依赖性生长
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.09.001
〔摘 要〕 目的探究肌腱蛋白C (TNC)对胃癌细胞SGC7901的锚定非依赖性生长的影响。方法采用免疫组化和Western blot分别检测胃癌组织和胃癌细胞系中TNC的表达;通过CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除SGC7901细胞中的TNC基因并用软琼脂生长实验观察SGC7901和SGC7901~(TNC-/-)细胞的锚定非依赖性生长的情况;Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)用于分析细胞内促生长信号传导通路蛋白的表达情况。结果 TNC在检测的胃癌组织和细胞水平高表达;在SGC7901细胞中敲除TNC引起软琼脂实验中集落形成缺陷;对几种细胞内生长促进信号传导途径的分析表明,在SGC7901细胞中TNC基因敲除后,c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平降低;在SGC7901~(TNC-/-)细胞中,发现整合素β7(ITGB7)在mRNA和蛋白质水平均显著下降。结论 TNC在胃癌中特别是SGC7901细胞中高表达,并且可能通过ITGB7介导的信号通路调节SGC7901细胞的锚定非依赖性生长。