〔摘　要〕 目的 旨在利用含有抗生素耐药盒的线性PCR片段对鲍曼不动杆菌靶基因片段进行同源重组替换，实现基因的快速敲除及功能验证。方法 以鲍曼不动杆菌Ab4294菌株为研究对象，PCR分别扩增fim基因簇(全长4 980 bp)上游901 bp、下游1 028 bp的序列作为重组的同源臂；从pUC57质粒中扩增获得卡那霉素抗生素耐药盒(KanR);利用重叠延伸PCR技术将上述3个片段连接，并将连接片段转化至鲍曼不动杆菌Ab4294中，筛选获得基因缺失突变株，构建质粒回补株，对所得菌株进行表型鉴定，探究fim基因簇的功能。结果 利用含有抗生素耐药盒的线性PCR片段同源替换的方法 成功构建了fim基因簇缺失的鲍曼不动杆菌Ab4294突变菌株；缺失菌株与野生株相比生长速率无明显差异，蹭动运动能力明显下降，回补该基因簇后表型恢复。结论 利用含有抗性耐药盒的线性PCR片段同源替换的方法 成功敲除鲍曼不动杆菌Ab4294的fim家族基因簇，该基因簇编码产物参与鲍曼不动杆菌的蹭动运动。