基金项目: 四川省科技厅面上项目(编号:2017JY0111);;泸州市-校联合(编号2016LZXNYD-J20);;西南医科大学重点项目(编号:2016013);;西南医科学青年基金(编号:23)
作者:郑睿;谭裕洁;古萌琴;康婷;郭玲;
关键词:N-乙酰半胱氨酸;;脂多糖;;TNF-α;;IL-1β;;人牙周膜成纤维细胞
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.06.018
〔摘 要〕 目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜成纤维细胞(hP DLFs)中关于人类肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)合成的影响。方法hP DLFs通过原代培养获得。以不同浓度的NAC或LPS刺激细胞,使用细胞计数试剂盒8(CCK-8)在不同时间点(24、48、72 h)测量细胞增殖情况,以此得到药物的最适浓度。通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析测定IL-1β,TNF-α和核转录因子(NF-κB)的mRNA水平。通过酶联免疫吸附测定(ELISA)测量IL-1β,TNF-α和NF-κB的蛋白质水平。结果随着NAC药物浓度的升高,细胞的增殖率上升,并且在NAC处于1 mmol/L时到达顶峰,此后细胞增殖率随NAC浓度增高而下降。LPS可诱导hP DLFs中的IL-1β,TNF-α和NF-κB mRNA及蛋白表达的增加。然而NAC预处理抑制了这些效应。结论 NAC通过抑制NF-κB活性,从而抑制LPS诱导的hP DLFs中TNF-α和IL-1β的合成。