基金项目: 国家自然科学基金面上项目(编号:81370487)
作者:肖中岳;轩青霞;高强;
关键词:NADPH氧化酶;;Nox2;;Nox4;;炎症性肠病;;结肠炎
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.02.013
〔摘 要〕 目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶家族的主要成员NADPH氧化酶2 (Nox2)和Nox4在小鼠肠炎模型结肠组织中的表达及意义。方法选用6~8周龄的129S/SV雄性小鼠建立结肠炎模型,将其随机分为对照组、1. 5%葡聚糖硫酸钠(DSS)组和3. 0%DSS组,对照组自由饮水,1. 5%DSS组和3. 0%DSS组分别给予含1. 5%DSS和3. 0%DSS饮用水自由饮用6 d。通过体质量变化、疾病活动指数(DAI)评分和组织病理学评分等方法评估肠道炎症程度。使用酶标仪间接测定小鼠血清中丙二醛(MDA)的含量,以评估实验小鼠的氧化应激程度。采用实时定量PCR技术检测结肠组织中促炎因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及Nox2和Nox4 mRNA表达情况;采用免疫组织化学法检测结肠组织中Nox2和Nox4蛋白表达情况。结果对照组小鼠未见肠炎表现,1. 5%DSS组小鼠呈轻度肠炎表现,3. 0%DSS组小鼠呈重度肠炎表现。杯状细胞在1. 5%DSS组体积增大、数量减少,在3. 0%DSS组进一步减少,甚至消失(均P <0. 05)。MDA在1. 5%DSS组升高,在3. 0%DSS组进一步升高(均P <0. 05)。Nox2和Nox4 mRNA和蛋白的表达量在不同炎症程度时表达不同。两者mRNA和蛋白的表达量一致,炎症组均显著高于对照组,且均随炎症程度增加表达进一步增加(均P <0. 05)。Nox2蛋白主要表达于浸润的吞噬细胞和中性粒细胞等炎细胞中;Nox4蛋白表达于中性粒细胞和淋巴细胞等炎细胞中。结论 Nox2和Nox4在小鼠肠炎的发病过程中发挥重要作用。