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FGF13VY腺病毒过表达载体的构建及其鉴定

安徽医科大学学报 2018 12 v.53 1956-1959     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81770407);;河北省自然科学基金(编号:H2017206262、C2018206277);;河北省高等学校科学技术研究项目(编号:ZD2015007、ZD2016002、Z2015005);;河北省高层次人才资助项目(编号:A2017005070);;河北医科大学大学生创新性实验计划项目(编号:USIP201509A)

作者:董梅;陈宇峰;孙如梦;华乐;杨甫;孟丹琳;杨晶;王川;

关键词:FGF13VY;;腺病毒载体;;绿色荧光蛋白;;背根神经节

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.12.030

〔摘 要〕 利用PCR技术扩增目的基因FGF13VY亚型,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体p Shuttle-CMV中,进而转化至含有Ad Easy质粒的大肠杆菌中,进行重组。将所产生的腺病毒载体转染在HEK-293细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,将所获得的腺病毒在背根神经节中进行过表达,可检测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达在背根神经节神经元,q PCR检测到FGF13VY mRNA的表达明显升高。FGF13VY腺病毒过表达载体的成功构建,为研究其在DRG神经元中作用奠定了基础。