基金项目: 国家自然科学基金(编号:81600123)
作者:余学钊;汪洋;叶琦;陶瑜;
关键词:多肽;;缺血性心脏病;;低氧;;H9c2细胞;;细胞凋亡
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.11.018
〔摘 要〕 目的探讨过氧化物酶5来源的多肽(pPRDX5tide)对心肌细胞低氧损伤的保护作用。方法应用生物信息学对心肌低氧多肽组进行分析,初步筛选在低氧后显著上调的pPRDX5tide为候选生物活性多肽,进一步对其稳定性、保守性等基本信息分析,在细胞水平对H9c2大鼠心肌细胞进行pPRDX5tide的预处理后,分别应用低氧袋和化学模拟物氯化钴(Co Cl2)建立物理和化学性低氧损伤的实验模型,检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)的水平;台盼蓝染色法检测细胞死亡率;双氯荧光素(DCFH-DA)染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平;蛋白质免疫印迹检测半胱天冬酶-3(Caspase3)、多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)的活化。结果预处理10、20、50μmol/L pPRDX5tide对物理低氧和化学低氧造成的心肌细胞损伤呈剂量依赖性的保护作用。50μmol/L pPRDX5tide能显著降低上清中LDH水平,提高细胞的存活率,降低ROS水平,抑制低氧造成的细胞凋亡。结论 pPRDX5tide能显著抑制低氧对细胞造成的损伤,发挥保护作用。