基金项目: 四川省教育厅重点项目(编号:12ZA075);;四川省医学会科研课题计划(编号:S17074)
作者:刘茂春;刘亮;普娟;陈慧;徐斌;刘学良;郑晓梅;
关键词:载脂蛋白J;;骨髓间充质干细胞;;脑出血;;补体3
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.09.009
〔摘 要〕 目的探讨载脂蛋白J(Apo J)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脑出血大鼠补体3(C3)表达的影响。方法采用贴壁筛选法体外培养并纯化大鼠BMSCs,利用脂质体介导重组质粒p EGFP-N1-Apo J转染BMSCs。建立大鼠尾状核脑出血模型,随机分为Apo J/BMSCs组、BMSCs组和NS组,每组24只,三组分别于建模后24 h在脑出血部位移植等体积转染Apo J基因的BMSCs悬液、BMSCs悬液、生理盐水,各组再根据移植后喂养时间不同分为1、3、5、7 d 4个亚组,每亚组6只。采用RT-PCR法和免疫组织化学染色技术分别检测血肿周围脑组织C3 mRNA和蛋白质的表达情况。结果应用全骨髓贴壁法成功分离、培养出活性及纯度较高的BMSCs,携带Apo J基因的BMSCs能够表达外源性Apo J。RT-PCR和免疫组化结果显示,与NS组和BMSCs组比较,Apo J/BMSCs组各时间点C3的mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),且BMSCs组亦低于NS组(P<0.05)。结论Apo J基因修饰的BMSCs能明显下调C3的表达,证实Apo J对脑出血的神经保护作用是通过抑制补体激活而实现的。