基金项目: 海南省卫生厅科研立项课题(编号:琼卫2011-73);;海南省科学技术厅重点研发计划(编号:ZDYF2017087)
作者:张亚珍;何贵省;吴晓明;宋杰峰;吴煌福;
关键词:结直肠癌;;miR-30b-5p;;LDLR;;胆固醇;;增殖
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.07.014
〔摘 要〕 目的探索miR-30b-5p在结直肠癌中的作用及机制。方法收集结直肠癌患者的癌及癌旁组织、患者及正常人血清,提取RNA,实时荧光定量PCR检测miR-30b-5p表达。将miR-30b-5p的inhibitors转入HT-29细胞中;将miR-30b-5p的mimics转入HCT-116细胞中;CCK-8试剂盒检测细胞活力;胆固醇试剂盒检测细胞中胆固醇含量;实时荧光定量PCR检测低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达,Western blot检测LDLR蛋白表达;在转入miR-30b-5p inhibitors的HT-29细胞中应用siRNA敲低LDLR,检测LDLR蛋白表达、细胞胆固醇含量及细胞增殖。结果与正常人相比,miR-30b-5p在结直肠癌患者组织及血清中表达降低,且其在结直肠癌细胞系HT-29、Caco-2及HCT-116中的表达量低于正常结直肠细胞系NCM460;在HT-29细胞中转入miR-30b-5p的inhibitors,细胞增殖加快,胆固醇含量增加,LDLR表达上调;在HCT-116细胞中转入miR-30b-5p的mimics,细胞增殖减慢,胆固醇降低,LDLR表达被抑制;此外,在miR-30b-5p沉默的HT-29细胞中敲低LDLR,胆固醇含量减少,细胞增殖减慢。结论 miR-30b-5p在结直肠癌中是一种抑癌microRNA,它通过抑制LDLR和胆固醇合成抑制结直肠癌细胞增殖。