基金项目: 河北省自然科学基金(编号:C2010001767);;唐山市科学技术研究与发展计划项目(编号:14130256B);;华北理工大学研究生创新项目(编号:2017S43)
作者:贾文婷;陈国福;张雪鹏;张笑博;孙影;赵莹;
关键词:乳腺癌;;RNA干扰;;解聚素-金属蛋白酶17;;骨髓间充质干细胞
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.04.020
〔摘 要〕 目的探讨利用裸鼠乳腺癌荷瘤模型转染解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)-shRNA的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对乳腺癌移植瘤的抑制效果。方法将人乳腺癌细胞(MCF-7)接种于30支裸鼠皮下,14 d后乳腺癌荷瘤裸鼠模型成功构建。随机分为:转染组(注射1×10~6/ml转染ADAM17-shRNA的BMSCs)、BMSCs组(注射1×10~6/ml BMSCs)和对照组(注射空白PBS)。采用贴壁筛选法分离、培养3周龄雄性SD大鼠的BMSCs,利用慢病毒介导将ADAM17-shRNA转染第3代培养的BMSCs,将其通过尾静脉注射给各组荷瘤裸小鼠(0.1 ml/次)3 d重复一次,共5次,观察各组裸小鼠肿瘤的生长状况。抑瘤实验16 d后处死裸鼠,HE染色法观察各组瘤体的形态结构,免疫组化法检测各组瘤体ADAM17、表皮细胞生长因子受体(EGFR)和细胞增殖核抗原(Ki-67)的表达。结果转染组、BMSCs组、对照组裸鼠瘤体体积分别为(375.09±20.72)、(768.85±35.55)、(783.75±27.30)mm3,转染组相较于对照组移植瘤体积缩小,差异有统计学意义(P<0.05),而BMSCs组差异无统计学意义。HE染色镜下可见,与对照组相比转染组可见瘤体组织大片坏死区域、坏死区域细胞崩解、细胞结构消失,而BMSCs组与对照组差异无统计学意义。转染组ADAM17、EGFR、Ki-67蛋白与对照组相比表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05);BMSCs组和对照组相比较,差异无统计学意义。结论 ADAM17-shRNA通过BMSCs介导可靶向归巢至裸鼠乳腺癌移植瘤并发挥抑制裸鼠乳腺癌ADAM17、EGFR和Ki-67表达的作用。