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TGF-β1介导人乳牙牙髓干细胞分化为血管平滑肌细胞的研究

安徽医科大学学报 2018 03 v.53 338-343     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金资助计划(编号:KJ2011Z183、KJ2016A324)

作者:胡露露;艾琦;胡晓燕;杨梓;王银龙;沈军;

关键词:组织工程学;;成血管;;乳牙牙髓干细胞;;平滑肌细胞

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.03.002

〔摘 要〕 目的血管化的主要方案是先生成血管组成细胞(血管内皮细胞和血管周细胞),然后将这些细胞构建成血管结构。由于受体自身内皮细胞和血管平滑肌细胞的稀缺性和异质性,限制了其在血管组织工程学中的广泛运用。因此,本研究对于人乳牙牙髓干细胞(SHED)是否能够诱导分化成为功能性血管平滑肌细胞(v SMCs)进行了相关方面的研究。方法利用转化生长因子(TGF)-β1作为刺激因子,诱导SHED分化为v SMCs。完成诱导后,通过RT-PCR、流式细胞术分析、Western blot和免疫荧光技术检测基因和特异性蛋白表达情况。此外,借助Matrigel血管生成功能实验来验证SHED来源的v SMCs是否能行使平滑肌细胞的功能。结果通过分析平滑肌细胞特定标志物(如α-SMA、SM22α、Calponin和SM-MHC)的表达,证实了TGF-β1可以诱导SHED分化为v SMCs,且流式细胞术证实分化的效率处于较高的水平,其标志物表达比例高达α-SMA 86.1%,SM22α93.9%,Calponin 56.8%,SM-MHC 88.2%。体外Matrigel血管生成功能实验表明,由SHED诱导分化的v SMCs在稳定由人脐静脉血管内皮细胞所形成的血管结构中发挥着与原代v SMCs相似的作用。结论在血管组织工程中,SHED可以成功地诱导为v SMCs,能够成为血管组织工程中一种有前景的种子细胞。