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网膜素-1对结肠癌干细胞增殖凋亡的影响及其机制研究

安徽医科大学学报 2018 02 v.53 185-190     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金面上项目(编号:1508085MH150)

作者:万丽娟;张群慧;陈明卫;季华;

关键词:网膜素;;结肠癌;;干细胞;;脂肪因子;;丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.02.005

〔摘 要〕 目的探讨网膜素-1(Omentin-1)对结肠癌干细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法采用间接免疫磁珠法分选结肠癌干细胞,分别采用克隆球形成实验、分化实验和流式细胞术鉴定结肠癌干细胞。以结肠癌干细胞为研究对象,设立对照组、Omentin 1组(1μg/ml Omentin-1)、Omentin2组(2μg/ml Omentin-1)、Omentin LY组(1μg/ml Omentin-1+50μmol/L LY294002)、LY组(50μmol/L LY294002),CCK-8方法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,同时分别检测Omentin-1干预细胞0、1、6、24、48 h后细胞增殖变化。Western blot法检测对照组、Omentin 1组、Omentin 2组丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶(p Akt)蛋白表达。结果成功分选培养结肠癌干细胞,CD133+结肠癌干细胞含量达80.3%;与对照组相比,其余4组吸光度(OD)值均下降,细胞凋亡率均上升(P<0.05);与Omentin 1组相比,Omentin 2组OD值更低,细胞凋亡率高(P<0.05);分别与Omentin 1组和LY组相比,Omentin LY组OD值低,凋亡率高(P<0.05);Omentin-1对结肠癌干细胞的作用随时间延长,OD值呈逐渐下降趋势(P<0.05);与对照组相比,Omentin 1组和Omentin 2组p Akt/Akt蛋白表达量均下降,其中Omentin 2组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Omentin-1可抑制结肠癌干细胞增殖,促进其凋亡,与LY294002具有协同作用,其作用机制可能与抑制Akt通路有关。