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膀胱癌中miR-203的表达及其对吉西他滨化疗敏感性的影响

安徽医科大学学报 2018 01 v.53 71-75     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1708085QH179)

作者:林垚;沈洲;牛三强;许言;刘治;宣强;

关键词:膀胱癌;;miR-203;;吉西他滨;;化疗敏感性

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.01.016

〔摘 要〕 目的探讨microRNA-203(miR-203)在膀胱癌中的表达以及其对吉西他滨化疗敏感性的影响。方法应用Vita-Blue法检测膀胱癌细胞系对吉西他滨的敏感性差异并测定半数抑制浓度(IC_(50))值。应用探针法实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Taqman-qRT-PCR)检测27例膀胱癌组织和癌旁组织以及膀胱癌细胞系5637、Um-Uc-3、J82、SCa BER、T24、Biu87中miR-203的表达水平。同时构建带有四环素诱导表达系统的miR-203超表达载体(pINDUCER21-EGFPmiR-203),在吉西他滨化疗耐受的Um-Uc-3细胞中转染pINDUCER21-EGFP-miR-203,并用多西环素诱导表达,未诱导表达的为阴性对照,在化疗敏感的T24细胞中分别转染miR-203 Antagomir和Antagomir control,同样使用TaqmanqRT-PCR和Vita-Blue方法检测膀胱癌细胞系中miR-203表达水平的变化及对吉西他滨的敏感性。结果在膀胱癌组织中miR-203的表达显著低于癌旁组织,在膀胱癌细胞系T24中miR-203的表达水平最高,Um-Uc-3细胞系中表达水平最低(P<0.01)。膀胱癌细胞系T24和Um-Uc-3细胞中对吉西他滨的IC_(50)值分别为(0.46±0.08)ng/ml和(5.94±0.53)ng/ml(P<0.01);pINDUCER21-EGFP-miR-203(D+)可以明显增加Um-Uc-3细胞的化疗敏感性,而miR-203 Antagomir可以显著抑制T24细胞对吉西他滨的化疗敏感性。结论 miR-203与膀胱癌的发生发展相关,其高表达水平将提高膀胱癌对吉西他滨的化疗敏感性。