〔摘　要〕 目的构建结核分枝杆菌外排泵蛋白MmpL6(Rv1557)表达载体,在大肠杆菌E.coli中诱导MmpL6蛋白高表达并进行纯化。方法以结核分枝杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段,构建pET21b-MmpL6表达载体。将表达载体转化至大肠杆菌中,加入异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,并针对不同表达菌株、温度进行优化,获取最优表达条件。采用Ni-NTA亲和层析以及凝胶过滤色谱纯化目标蛋白。结果成功构建pET21b-MmpL6重组表达质粒,经IPTG诱导后,在Rosetta菌株中25℃条件下获得最高表达量。结论成功表达并纯化了MmpL6蛋白,为该蛋白后续的结构与功能研究奠定了基础。