基金项目: 2017年度广西高校中青年教师基础能力提升项目(编号:2017KY0367);;2017年广西科技大学自然科学培育计划项目;;2016年度广西科技大学科学基金项目(编号:校科自174514);;2016年广西科技大学科学基金项目培育专项基金
作者:徐雅玲;黄巨恩;
关键词:改构型酸性成纤维细胞生长因子;;肝细胞;;细胞培养;;增殖
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.11.018
〔摘 要〕 目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)对体外培养大鼠肝细胞增殖的影响。方法采用"0.25%胰酶+0.1%胶原酶"消化法分离培养大鼠肝细胞并传代纯化扩增,取第3代细胞鉴定后实验:(1)形态学法观察在不同浓度MaFGF组中细胞的形态变化;(2)将实验随机分为对照组和MaFGF组,MaFGF组加入一系列浓度的MaFGF,MTT法测定不同浓度MaFGF组作用于肝细胞24、48、72h的促增殖活性;(3)MTT法筛选出最适的MaFGF浓度,用此浓度和不加生长因子2种方式培养细胞,并绘制细胞生长曲线。结果(1)MaFGF对体外培养的肝细胞有一定的促增殖作用,但是与浓度不成正比;且实验表明24h的增殖率较其它时间点显著增高(P<0.05);比较对照组和各组(4.68×10~(-3)~7.80×10~(-3)mg/LMaFGF组)均差异有统计学意义(P<0.05),但各组间对肝细胞的促增殖作用的差异无统计学意义;(2)最适浓度(6.24×10~(-3)mg/L)MaFGF的第4天细胞数量较对照组明显增加(P<0.05);MaFGF组的第10天细胞数(12.4×10~4)是对照组(6×10~4)的2.1倍(P<0.05)。结论在适宜浓度和时间内,MaFGF对肝细胞具有一定的促增殖作用且不具有浓度依赖性。